半乳糖檢測試劑盒-熒光法100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
半乳糖檢測試劑盒-熒光法100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
半乳糖檢測試劑盒-熒光法100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
HAN(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2

間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基MCDM-prf

NT5E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD73 / NT5E 人細胞裂解液 (陽性對照)

HeLa細胞，人細胞 小鼠T淋巴細胞瘤細胞,Cyc-Tag(S49)細胞 原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

CM-M122小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞*培養(yǎng)基100mL

hMSC-BM Pellet 人類骨髓間質(zhì)干細胞團塊 > 1 mio.cells 人肺微血管內(nèi)皮細胞總RNAHPMEC tRNA
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP

FST Others Human 人 FST / Follistatin 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H524 人小細胞肺癌

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞

人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs)

人肺成纖維細胞;HFL1 人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人腦膜細胞裂解物HMCL

人細胞;Hela S3 [HeLaS3]

A-431細胞，表皮癌細胞 人耐VCR胃腺癌細胞,SGC-7901/VCR細胞 豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6

SERPINF1 Others Mouse 小鼠 SerpinF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
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