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更新時(shí)間:2017-07-07 12:00:43瀏覽次數(shù):138次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)NO清除劑(NO Scavenger)5ml實(shí)驗(yàn)方法
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ROS活性氧抑制劑 / ROS清除劑10ml使用說(shuō)明書
二氧化氮(NO2)檢測(cè)試劑盒200T實(shí)驗(yàn)方法
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纖維母細(xì)胞粘附檢測(cè)試劑盒Fibro
TNFRSF18 Others Human 人 GITR / TNFRSF18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
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CL-0052Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HMEpC Pellet 人類上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人髓核細(xì)胞cDNAHNPC cDNA
磷脂酶D檢測(cè)試劑盒-熒光法100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
磷脂酶D檢測(cè)試劑盒-熒光法100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
磷脂酶D檢測(cè)試劑盒-熒光法100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Daudi細(xì)胞,人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf
NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
ITGA8 & ITGB1 Others Human 人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人毛細(xì)胞總RNAHHDPC tRNA
KYSE450 人食管癌細(xì)胞
CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2 人子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒 可見分光光度法 25管/24樣
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Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
Humananti-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancyclooxygenase-2,COX-2ELISA試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織GSK3β激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolySeriumAntigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人*10(KLK10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人激活素A(ActivinA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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