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更新時間:2017-07-07 11:58:42瀏覽次數(shù):184次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Caki-2(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人淋巴內皮細胞裂解物HLECL
NTRK1 Others Rat 大鼠 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
A2780/Taxol細胞,人卵巢癌*耐藥株 鼠腹水單核細胞瘤,J774A.1細胞 前列腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2
HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
GALNT2 Others Human 人 GALNT2 / GalNAc-T2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0053Calu-1(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
ZR-75-30細胞,人癌細胞系 人T淋巴細胞(白血病CD8+),Molt-4細胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
BRL-3A(大鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2
CPE Others Human 人 CPE 人細胞裂解液 (陽性對照)
CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人內根殼細胞裂解物HHIRSCL
人腦微血管內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MC3T3-E1細胞,小鼠成骨細胞系 V79(中國倉鼠肺細胞) 家兔骨髓間充質干細胞;2012083MSC
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)
COLO 201(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠磷酸二酯酶12(PDE12)ELISA試劑盒 ,英文名: PDE12 ELISA Kit
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA檢測試劑盒Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 96T/48T
大鼠牙本質基質蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Rat Dentin Matrix Protein 1,DMP1 ELISA Kit
英文名稱RatHLA-1ELISAKit大鼠組織相容性抗原(HLA-1)規(guī)格:96T/48T
鈣離子膜通道二氫吡啶受體(DHPR)功能熒光檢測試劑盒20次
ELISAKitLp-PL-A2人脂蛋白磷脂酶A2規(guī)格:48T/96T
豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cytokeratin 18 (CK-18) ELISA Kit 人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒
Humanmicrotransferrinuria,MTFELISAKit 人微量轉鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclinDependentKinase5,CDK5ELISA試劑盒人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FGFR4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPresenilin2,PS-2ELISAKit人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法人膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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