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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 琥珀酸脫氫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-07 11:55:17瀏覽次數(shù):112次
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琥珀酸脫氫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
琥珀酸脫氫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
琥珀酸脫氫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA cDNA
BGN Others Mouse 小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BT-549細(xì)胞,人癌細(xì)胞 白鰱尾鰭細(xì)胞,SCF細(xì)胞 頜下腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0204Sf-21(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HAoAF Pellet 人主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物HELM-d L
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-H017人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Loo細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HS-6細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406
Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
U-2 OS細(xì)胞,骨肉瘤細(xì)胞 *系,KMB-17細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3
小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA
FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Humantubularbasementmembraneantibogy,TBMELISAKit 人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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Humanproliferatingcellnuclearantigenantibody,PCNAELISAKit人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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