ATP酶檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
ATP酶檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
ATP酶檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人骨骼肌細(xì)胞cDNAHSkMC cDNA

SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

4T1細(xì)胞，人癌細(xì)胞 昆蟲(chóng)細(xì)胞系,Sf-21細(xì)胞 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CL-0244WISH(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NHDF adult Pellet 正常人皮膚成纖維細(xì)胞團(tuán)塊(捐獻(xiàn)者) > 1 mio.cells CCCSCK
CL-0076EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GHR Others Rat 大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EpiFectagen? 上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒

HO-8910PM細(xì)胞，人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞 小鼠肉瘤細(xì)胞,S37細(xì)胞 腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)

CTLL-2(小鼠T細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HBEpC Pellet 人支氣管上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞cDNAHPAF cDNA
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1

CL-0433RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SL-7細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 人前列腺上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A

魚(yú)源細(xì)胞

DPP4 Others Human 人 DPPIV / DPP4 / CD26 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGI2 ELISA Kit

人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytotoxin,CTXELISAKit 96T/48T

魚(yú)熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒 Fish Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit

CLIAKitforPF-3(Humanplaetfactor3)ELISAKit人血小板因子3規(guī)格：48T/96T

食物糖精(saccharin)含量高效液相色譜法法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitTSH人促甲狀腺素規(guī)格：48T/96T
豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat signal transduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒

Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCryoglobulin,CGELISA試劑盒人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
ATP酶檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗肝微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝