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甲苯胺藍(lán)水溶液(0.1%)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:53:00瀏覽次數(shù):573次

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甲苯胺藍(lán)水溶液(0.1%)100ml實驗方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

甲苯胺藍(lán)水溶液(0.1%)100ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
甲苯胺藍(lán)水溶液(0.1%)100ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1

CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

LTEP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系,VERO E6細(xì)胞 CM-M050小鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

NHEK.f-c pooled 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年,混合 500,000cells 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0270CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

KB-C1.5細(xì)胞,細(xì)胞 T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2

769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CSNK1G2 Others Human CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人骨骼肌成肌細(xì)胞HSkMM

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184

BHK細(xì)胞,幼倉鼠腎細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J

RTN4R Others Human RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠*(FA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1 ELISA Kit

γ-谷酰半胱酸連接酶(GCL)測試盒 可見分光光度法 50/48

RatMelatonin,MT/MLISA試劑盒大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanheparincofactor,HCELISA試劑盒人肝素輔因子Ⅱ(HC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanliverkidneymicrosomeautoantibody,LKMELISAKit人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒

HumanCaldesmon,CALDELISAKit 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinepsilon,C/EBPεELISA試劑盒人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米Bt-Xtra品系基因檢測試劑盒20

humanserum/glucocorticoidregulatedkinase2,GSK2ISAKIT人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍(lán)水溶液(0.1%)100ml實驗方法人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人水帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人水帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人雙氫睪(DHT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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