酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue250T实验方法 返回列表页

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酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue250T实验方法实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
    把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue250T实验方法注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
CCL-149(大鼠肺泡上皮细胞) 5×106cells/瓶×2

CM-M005小鼠气管平滑肌细胞*培养基100mL

TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)

KYSE 450细胞，人食管鳞癌 神经胶质瘤细胞,CRT细胞 家兔肾细胞;RABK3

小鼠肾足细胞;Mouse podocyte

PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚胎心肌组织来源细胞;CCC-HEH-2

IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0285L-O2(人正常肝细胞)5×106cells/瓶×2

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 小鼠胚胎成纤维细胞，3T6swiss细胞 Hs 1.Tes(正常人细胞)

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2C

NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicastrin 人细胞裂解液 (阳性对照)
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照)

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)

JAR 人胎盘绒毛癌细胞

RWPE-1人正常前列腺上皮细胞 RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF

FIGF Protein Human 重组人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 标签)

小鼠神经黑质细胞(MN-sn)(1×106) T24, 人膀胱癌细胞 Human
大鼠总抗氧化能力( T-AOC) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)免疫试剂盒 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： RNP-Ab ELISA Kit

Ratinterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISA试剂盒大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA试剂盒人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanInterleukin18，IL-18ELISAKit人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human chromogranin A (CgA) ELISA Kit 人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒

HumanToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humananti-Survivinantibody,SurvELISA试剂盒人抗存活素抗体/生存蛋白(Surv)ELISA试剂盒规格：96T/48T

植物纤维素酶(cellulase)活性荧光定量检测试剂盒20次

Humantriple-helicalpeptide，THPELISAKit人螺旋肽(THP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue250T实验方法小鼠17-类固醇(17-KS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠17羟孕(17-OHP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠16α羟基雌1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装