活细胞/膜损伤细胞双染试剂盒500T免费代测-上海莼试生物技术有限公司

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活细胞/膜损伤细胞双染试剂盒500T免费代测实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
活细胞/膜损伤细胞双染试剂盒500T免费代测注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
C2C12(小鼠成肌细胞) 5×106cells/瓶×2

T-107A*(含10mL酶解缓冲液)1mL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

HEp-2细胞，人喉表皮样癌细胞人脐静脉内皮细胞,HUVE-12/CRL2480细胞叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21

大鼠胰岛β细胞瘤细胞;RIN-m5F

CNTN1 Others Human 人 CNTN1 / Contactin-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人肺转化细胞;AE1201

猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1 大鼠肾细胞，NRK细胞 NBTF细胞，新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞

人羊膜细胞;WISH

HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照)

气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

大鼠尿道上皮细胞*培养基 100mL

SHZ-88大鼠癌细胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培养基+10%FBS

IGFBP4 Protein Mouse 重组小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 标签)

Hep B1.2(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 痢疾志贺氏菌
大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒，英文名： GIP ELISA Kit

人血清素/血清胺(ST)ELISA检测试剂盒HumanSerotonin,SISAKit 96T/48T

鱼葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)免疫试剂盒 Fish glucose-6-phosphatase,G6PC ELISA kit

CLIAKitforPF/PFP(HumanPerforin/Pore-formingprotein)ELISAKit人穿孔素/成孔蛋白规格：48T/96T

食物维生素A高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

ELISAKitE3人雌三醇规格：48T/96T
小鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装

Human growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 人生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒

Humangastricinhibitorypolypeptide,GIPELISAKit 人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humananti-ribonucleoproteinAntibody,RNP-AbELISA试剂盒人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

植物细胞原生质体化学转染试剂盒10次

HumanTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit人坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
活细胞/膜损伤细胞双染试剂盒500T免费代测小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装