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更新時間:2017-07-05 11:08:12瀏覽次數(shù):181次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實(shí)驗(yàn)方法
儲存條件:蛋白提取液室溫保存;
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
昆蟲蛋白提取試劑盒(二維電泳用)適用于從各種昆蟲組織和細(xì)胞樣本中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白用于等點(diǎn)聚焦電泳、雙向電泳。
昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
蒲公英 Taraxacum officnala Taraxerol 蒲公英賽醇 127-22-0 C30H50O ≥98%
氧基血根減qthoxyscnguincrinq834-31-620mg
連翹脂苷B;連翹脂甙B Forsythoside B 81525-13-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130506-200401含量測定
6”-沙苑子苷單酯 6’’-malonate-complanatuside 20mg HPLC≥98% 6”-沙苑子苷單酯用于含量測定
26155-31-7 酒石莫侖太爾標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
emopenpi100mg
Baohuoside II 寶藿苷II 55395-07-8
Misoprostol *標(biāo)準(zhǔn)品59122-46-2 100mg*標(biāo)準(zhǔn)品
澳茄新堿 27028-76-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
黃豆黃苷 40246-10-4 檢測用對照品 黃豆黃甙
夜香牛Vernonia cinerea metxyl 2-(5-acetyl-2,3- dixy7nobenzofuran-2-yl)propenoate 2-(5-乙酰基-2,3-二輕本并呋喃-2-基)丙烯酸甲酯 617722-55-1 C14H14O4 靈青銅成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G021
對照品辣椒素110839-200403鑒別
pxenylpropanediol本丙二醇標(biāo)準(zhǔn)品1855-09-0 100mg本丙二醇標(biāo)準(zhǔn)品
豬屎豆Crotalaria pallida Eurycarpin A 黃甘草異黃酮 A 166547-20-2 C20H18O5 ≥97%
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人同型半*(Hcy)免疫試劑盒 Human Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
β-葡萄糖苷酶(β-GC)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISA試劑盒大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Humanosteoclastdifferentiationfactor,ODFELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實(shí)驗(yàn)方法人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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