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植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:51:06瀏覽次數(shù):138次

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植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

植物核蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細(xì)胞和各種實(shí)體植物組織,如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白和其它細(xì)胞質(zhì)蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的核蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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綠原醋LvYucnsucn20mg/

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*標(biāo)準(zhǔn)品9002-7-7300mg

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紅景天 Rhodiola Crenulata Salidroside 紅景天苷 10338-51-9 C14H20O7 98%

異補(bǔ)骨脂速Isopsorclqn20mg/

補(bǔ)骨脂定 psoralidin 18642-23-4 20mg HPLC98% 用于含量測定

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小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP2 ELISA Kit

人唾液酸(SA)ELISA檢測試劑盒HumanSialicacid,SAELISAKit 96T/48T

大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒 Rat plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit

英文名稱RatangiotensionIELISAKit大鼠血管緊張素I(AngI)規(guī)格:96T/48T

果菜類食物DNA分離試劑盒10

ELISAKitOxLDL人氧化低密度脂蛋白規(guī)格:48T/96T
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒

Humanneuronalnuclearautoantibody,ANNA-2/RiELISAKit 人抗神經(jīng)元核抗體2/Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEndostatin,ESELISA試劑盒人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織PKCβ1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法人丙酸激酶(PK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙肝抗原(HCV-AgELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙肝抗體(HCV)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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