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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測儲(chǔ)存條件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
植物核蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細(xì)胞和各種實(shí)體植物組織,如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白和其它細(xì)胞質(zhì)蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的核蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
車桑子Dodonaea viscosa 5,7,4'-Trixy7noxy-3,6-dimetxoxy -3',5'-diprenylflavone 5,7,4'-三羥基-3,6-二甲氧基-3',5'-二異戊烯基黃酮 1246926-08-8 C27H30O7 ≥95%
新綠原醋Grnoriginclccid20mg/支
京泥平苷酸;梔子酸 Geniposidic acid 27741-01-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130487-200302含量測定
新異甘草苷 Ne
246870-46-2 西替利嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
黃芪A.mongholicus Bunge 環(huán)黃芪醇 84605-18-5 C30H50O5 ≥98% 瑞鮑迪甙A18225-050
Oxaliplatin *對照品標(biāo)準(zhǔn)品61825-94-3 125mg
Verteporfin 維替泊芬標(biāo)準(zhǔn)品129497-78-5 200mg
葒草苷 28608-75-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
景東山橙Melodinus khasianus Vandrikidine none 50656-92-3 C22H26N2O4 ≥98%
異補(bǔ)骨脂速Isopsorclqn23-20-20mg
去甲氧基姜黃素 Demetxoxycurcumin 24939-17-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)試劑右旋糖酐菌種140622-200109生產(chǎn)用菌種
百秋李醇;虎尾草醇; 廣藿香醇 Patchouli alcohol 5986-55-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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我司植物核蛋白/胞質(zhì)蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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