植物核蛋白提取試劑盒50T實驗方法儲存條件：蛋白提取液，磷酸酶抑制劑2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

植物核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。制備的核蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

植物核蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
植物核蛋白提取試劑盒50T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
鉤藤Uncaria sessilifructus 3,6,19,23-Tetraxy7noxy-12-ursen-28-oic acid 3,6,19,23-四羥基-12-熊果-28-酸 91095-51-1 C30H48O6 ≥97%

鹽醋巴馬汀Mcrtinxy7nochloridqHPLC≥98%，20mg/支

金雞納減;奎寧 inoneine 130-95-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定奧美格雷鈉100837-200701常溫，避光100mg

利卡靈-B Li B 51020
2438-80-4 L-巖藻糖標準品 200mg

二輕歐山芹醇當歸醋酯ThetwoEuropeanmountainQinalcoholANGELOYLxy7nogen2028-13-9HPLC≥98%,20mg/支

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione (14BETA,22E)-8,14-環(huán)氧基賣角甾-4,22-二烯-3,6-二同 1265908-20-0

鼠酮 標準品 號：83-26-1 250mg

蒼術(shù)苷鉀鹽 102130-43-8 HPLC≥98%;20
海芒果Cerbera manghas Theviridoside 黃夾苦甙 23407-76-3 C17H24O11 ≥95%

異甘草苷Isoliquiritin2041-81-620mg

苦蒿素 Blinin 125675-09-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

檢查*中間體100887-200601常溫，避光20mg

(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷 (+)-pinoresinol-β-D-glucoside 69251-96-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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