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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
植物蛋白提取試劑盒50T使用說明書真珠草Phyllanthus urinaria 3',5,5',7-Tetraxy7noxy-4',6-dimetxoxyflavone 3',5,5',7-四羥基-4',6-二甲氧基黃酮 125537-92-0 C17H14O8 ≥95%
新*Nqohqspqridin20mg/支
絞股藍(lán)皂苷;絞股藍(lán)總皂苷 Stevenleaf 11028-00-5 20mg UV≥98% 用于含量測定
供檢查用*對(duì)映異構(gòu)體100836-201001常溫,避光50mg
* Calcitriol 32222
產(chǎn)品名稱:植物蛋白提取試劑盒50T使用說明書
儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液、穩(wěn)定劑2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細(xì)胞、組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡單方便。本試劑盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等蛋白研究。本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。如下游實(shí)驗(yàn)需要用于2D電泳、等電聚焦電泳,
植物蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物蛋白提取試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
24356-60-3 頭孢匹林鈉標(biāo)準(zhǔn)品 500mg
吉馬同;大根香葉同Germacrenegermacrone;690-91-6HPLC≥99%,20mg/支
Drevogenin A DREVOGENIN A 10163-83-4
Desoxycorticosterone Pivalate去氧皮質(zhì)酮新戊酸酯標(biāo)準(zhǔn)品808-48-0125mg去氧皮質(zhì)酮新戊酸酯標(biāo)準(zhǔn)品
8-氧黃連堿 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*基間本三酚 Three metxylbenzene three pxenol 50mg
異甘草速Isoliquiritigenin961-9-220mg
Atraric acid 2,4-二輕基-3,6-二甲基本甲酯 4707-47-5
鹽酸去甲羥基酮標(biāo)準(zhǔn)品50mg鹽酸去甲羥基酮標(biāo)準(zhǔn)品
牡荊內(nèi)酯;Vitexilactone 61263-49-8 20mg 訂購|咨詢
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