革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒100T免費代測
儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白穩(wěn)定劑-20℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

革蘭氏陽性菌總蛋白提取試劑盒可以從各種革蘭氏陽性菌菌體中提取總蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性，可用于報告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Westernblotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活分析等下游實驗。

革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
金銀忍冬Lonicera maackii 2,3,2",3"-Tetraxy7noochnaflavone 2,3,2",3"-四氫金連木黃酮 678138-59-5 C30H22O10 ≥98%

虎杖苷PolydctinHPLC≥98%;20mg/支

黃芩素;*元; 黃芩黃素; 5,6,7-三輕基黃同 Baicalein 491-67-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*0452-200001含量測定

Tectorigenin 7-o-xylosylglucoside鳶尾黃素
23031-32-5 流特布他林標準品 125mg

麝香同Muskketone241-91-3GC≥98%,0.15ml/支

Royleanone 羅列同 6812-87-9

Levocarnitine *標準品541-15-1 400mg

* 88495-63-0 HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢
云南石梓Gmelina arborea Olivetol 5-戊基間本二酚 500-66-3 C11H16O2 ≥97%

異茴芹內酯IsopimpinqllinHPLC≥98%，20mg/支

楝 Melia azedarach L. Toosendanin 苦楝素 58812-37-6 C30H38O11 純鋁系標樣(E411i-E417c

含量測定*100386-200702常溫，避光100mg

Disulfiram二硫化四乙基秋蘭姆標準品97-77-8200mg
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