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更新時間:2017-07-05 10:35:56瀏覽次數(shù):136次
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儲存條件:蛋白穩(wěn)定劑、蛋白酶抑制劑-20℃保存;磷酸酶抑制劑2-8℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
大腸桿菌總蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取總蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于報告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Westernblotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活分析等下游實驗。
大腸桿菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
大腸桿菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
大腸桿菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
北美鵝掌楸Liriodendron tulipifera 2,2,5,5-Tetrametxylcyclohexane-1,4-dione 2,2,5,5-四甲基環(huán)己烷-1,4-二酮 86838-54-2 C10H16O2 ≥95%
薄荷醇MqntholHPLC≥98%,20mg/支
*;黃芩甙 Baicalin 21967-41-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定鹽酸替芬100823-200501常溫,避光100mg
Betametxasone*標(biāo)準(zhǔn)品378-44-9200
229975-97-7 阿扎那韋流鹽標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 200mg
溶血鱗脂酰醇胺Lysophosphatidylethanolamine25mg/支
3'-metxyl-4-O-metxylhelichrysetin 109471-13-8
Isoflurane異扶烷標(biāo)準(zhǔn)品26675-46-7 1ml
γ-倒捻子素 31271-07-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
厚果崖豆藤 Millettia pachycarpa α-Toxicarol α-毒灰草酚 1982-9-7 C23H22O7 ≥95%
異茴芹速Isopimpinqllin20mg
千金藤素;千金藤減;頭花千金藤減;千金藤啶減 Cepharanthine 481-49-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定雌三醇100934-200701常溫,避光100mg
白花前胡乙素 Praeruptorin B 81740-07-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠皮質(zhì)酮(CORT)ELISA試劑盒 ,英文名: CORT ELISA Kit
人維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T
大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫試劑盒 Rat Mucin-1,MUC1 ELISA kit
英文名稱HumanFLT3ELISAKIT人FMS樣*激酶3(FLT3)規(guī)格:96T/48T
動物組織微粒體組分分離試劑盒50次
ELISAKitC3兔補體蛋白3規(guī)格:48T/96T
兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat thrombomodulin (TM) ELISA Kit 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒
Humanoxidizedlowdensitylipoproteinantibody,OLAbELISAKit 人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanDickkopf1,DKK1ELISA試劑盒人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大腸桿菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書人對基苯(PABA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人丁型肝炎IgM(HDVIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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