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更新時間:2017-07-05 10:34:55瀏覽次數(shù):126次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)菌蛋白提取試劑盒50T實驗方法儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;磷酸酶抑制劑2-8℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
細(xì)菌總蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取總蛋白,包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細(xì)菌,可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于報告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Westernblotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活分析等下游實驗。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒50T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
海芒果Cerbera manghas 17α-Thevebioside 17ALPHA-黃花夾竹桃二糖甙 114613-59-1 C36H56O13 ≥95%
丹酚醋ASclvicnolicccidc20mg/支
黃芪總皂苷 Astragaloside 17429-69-5 20mg UV≥98% 用于含量測定
含量測定*100817-200501常溫,避光100mg
Betametxasone wo7ium Phosphate*酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品151-73-5500mg
22916-47-8 Miconazole標(biāo)準(zhǔn)品 70mg
雞蛋花Plumeria rubra 15-去甲基雞蛋花甙 132586-69-7 C20H24O12 ≥97.5% 肌酸酐;2-安基-1,5-二輕-1-甲基-H-咪坐啉--同;縮水肌肉素;肌安基酐;肌酐0 8801
Esomeprazole 埃索美拉唑標(biāo)準(zhǔn)品217087-09-710mg
metxoxsalen 甲氧標(biāo)準(zhǔn)品298-81-7 500mg甲氧標(biāo)準(zhǔn)品
柴胡皂苷A 20736-09-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
金粟蘭Chloranthus spicatus Sarcandrone A none 1190225-47-8 C33H30O8 ≥95%
異類葉升麻苷cctqosidqisomqr20mg/支
柴胡皂苷B2;柴胡皂甙B2 Saikosaponin B2 58316-41-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
UV法含量測定*100685-200401常溫,避光100mg
Budesonide布*標(biāo)準(zhǔn)品51333-22-3200mg
小鼠*結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒 ,英文名: CBG ELISA Kit
人維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminC,VCELISAKit 96T/48T
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫試劑盒 Rat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit
英文名稱HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配體(Flt-3ligand)規(guī)格:96T/48T
動物組織細(xì)胞色素P450酶體系濃度定量檢測試劑盒20次
ELISAKitPY兔吡啶交聯(lián)物規(guī)格:48T/96T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat serum total complement (CH50) ELISA Kit 大鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒
HumanterminalcomplementcomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 人末端補體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISA試劑盒人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織MET激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)菌蛋白提取試劑盒50T實驗方法人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司細(xì)菌蛋白提取試劑盒50T實驗方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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