血細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：血細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法
儲存條件： 酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

血細胞蛋白提取試劑盒適用于從各種哺乳動物全血細胞中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細胞膜包括細胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。 本試劑盒中不含EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

血細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
血細胞蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
商陸Phytolacca acinosa α-Spinasterol glucoside ALPHA-波菜甾醇葡糖苷 1745-36-4 C35H58O6 ≥95%

皇芪苷cstrcgclosidqHPLC≥98%，20mg/支

環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 84605-18-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標(biāo)準(zhǔn)試劑乙酰本胺130440-200202

Petunidin chloride錄化矮牽牛素純度：>98%
22204-53-1 耐普生標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

紅景天速Rhodiolaroot86831-24-120mg

PandaMarilactonine B PANDAMARILACTONINE B 303008-81-3

異戊乙凈 標(biāo)準(zhǔn)品 號：22936-75-0 250mg

丹葉大黃素;Rhapontigenin 500-65-2 20mg 訂購|咨詢
驅(qū)蟲斑鳩菊 Vernonia anthelmintica Willd 0.5g

異綠原醋CCISOchlorogqnicccid3421-88-0HPLC≥98%，20mg/vial

丹皮酚原苷 1-[4-metxoxy-2-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trixy7noxy-6-[[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-trixy7noxyoxan-2-yl]oxymetxyl]oxan-2-yl]oxy-pxenyl]ethanone 72520-92-4 HPLC≥98% 20mg/支

阿魏酸1135-24-6Ferulic acid

芹菜素 Apigenin 520-36-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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