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腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:28:36瀏覽次數(shù):334次

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腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件: 蛋白酶抑制劑-20℃保存;

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

腦組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種哺乳動(dòng)物腦組織中提取總蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。

腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
廣玉蘭Magnolia grandiflora Syringin pentaacetate 五乙酸紫丁香甙酯 92233-55-1 C27H34O14 95%

*qugqnolHPLC98%,0.5ml/

花旗松素;黃杉素,紫杉葉素,二輕槲皮素、蚊母樹(shù)素 Taxifolin 480-18-2 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*130437-200502含量測(cè)定

Petunidin 3-galactoside chloride矮牽牛素半乳糖苷純度:>98%
22189-32-8 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

皇芪苷Astragaloside84687-43-4HPLC98%,20mg/

Paeonilactone C (3S,3AR,6S,7AR)-3-[(本甲酰基氧基)甲基]四輕-6-輕基-6-甲基-2,5(3H,4H)-本并呋喃二同 98751-77-0

芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品64550-34-1 6mg×3vials

輪環(huán)藤寧 294-90-6 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
賓鼠尾草Salvia dugesii Tilifodiolide none 126724-95-6 C20H16O5 98%

異牡荊苷Isovitqxin970-2-820mg

莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定*100893-200601常溫,避光100mg

1,5-二??鼘幩?/span>;洋薊素,洋薊酸,朝鮮薊酸,朝薊素,菜薊素 1,5-Dicaffeoylinoneic acid 30964-13-7 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定
小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYD ELISA Kit

人未磷酸化類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 96T/48T

大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)免疫試劑盒 Rat prostaglandin F synthase,PGFS ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatAT-IIIELISAKit大鼠抗*(AT-III)規(guī)格:96T/48T

簡(jiǎn)單細(xì)菌酚品紅染色試劑盒50

ELISAKitVK1人維生素K1規(guī)格:48T/96T
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒

HumanThyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISA試劑盒人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織IKKβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人鉤端螺旋體抗體(Lep-AbELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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