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更新時間:2017-07-05 10:27:39瀏覽次數(shù):129次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)品名稱:膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液A和B 2-8℃保存;試劑C室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
哺乳動物跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
廣玉蘭Magnolia grandiflora Syringaresinol diacetate 二乙酸丁香樹脂醇酯 1990-77-8 C26H30O10 ≥98%
各塞琳RoscrinHPLC≥98%;20mg/支
虎杖苷;云杉新苷;藜蘆醇苷 Polydatin 27208-80-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定 二乙酰安乙酸以兒按100795-200401常溫,避光100mg
Amlodipine Besylate本磺酸安錄地平標(biāo)準(zhǔn)品111470-99-6350mg
22161-81-5 *標(biāo)準(zhǔn)品(-20℃) 100mg
人參皂苷Rb3GinsenosideRb368406-6-8HPLC≥98%,20mg/支
IsoMangiferolic acid ISOMANGIFEROLIC ACID 13878-92-7
Artesunate*標(biāo)準(zhǔn)品88495-63-0200mg*標(biāo)準(zhǔn)品
11-羰基-Β-乙酰乳香酸 67416-61-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
NA 言系布曲明標(biāo)準(zhǔn)品 1ml
異歐前胡速ISOEuropebeforeHuSu48-42-1HPLC≥98%,20mg/支
Moracin O 123702-97-6
*相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品25mg*相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品
伐侖克林 375815-87-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃癌抗原MG7-Ag 免疫試劑盒 Human MG7-Ag ELISA Kit
*測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratplaet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmethotrexate,MTXELISAKit人甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
Humanrheumatoidfactor,RFELISAKit 人類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISA試劑盒人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織IGF-1R激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanplaetactivatingfactor,PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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