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更新時(shí)間:2017-07-05 10:20:32瀏覽次數(shù):156次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:骨組織蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測
儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白穩(wěn)定劑2-8℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動(dòng)物骨組織中樣品中提取總蛋白??梢蕴崛「鞣N密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品。提取過程簡單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細(xì)胞,成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞,其中含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
骨組織蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
骨組織蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
骨組織蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
大百部Stemona tuberosa Stilbostemin B 2-甲基-5-(2-本基乙基)-1,3-本二酚 162411-67-8 C15H16O2 ≥95%
氧化苦參減OxymctrinqHPLC≥98%,20mg/支
胡黃連苷I;胡黃連苦苷I Picroside I 27409-30-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用*雜質(zhì)100786-200501常溫,避光50mg
Estradiol Benzoate (AS)本甲雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品50-50-0250mg
217087-09-7 埃索美拉唑標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
西紅花苷IICrocinII22720-84-0HPLC≥98%,20mg/支
Neorauflavane NEORAUFLAVANE 53734-74-0
甲氧芐安嘧啶 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):738-70-5 250MG
似梨木雙黃酮-7-O-β-D-葡萄糖 50276-96-5 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptolide *甲素 38748-32-2 C20H24O6 ≥98%
異數(shù)李速-3-O-葡萄糖苷Isorhcmnqtin-3-O-glucosidq2041-8-710mg
牛蒡子苷;牛蒡苷 Arctiin 20362-31-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品對硝基本甲全130562-200501有關(guān)物質(zhì)檢查
α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷 α-spinasteryl-3-O-β-D-glucoside 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠泛醌細(xì)胞色素C還原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA試劑盒 ,英文名: UQCRC2 ELISA Kit
人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA檢測試劑盒Humanpro-gastrin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 96T/48T
大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)免疫試劑盒 Rat Hydroxymethylglutaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit
英文名稱RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲醛固定)(pANCA)規(guī)格:96T/48T
寄生蟲總RNA分離試劑盒20次
ELISAKitGastrin人胃泌素規(guī)格:48T/96T
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiotensin converting enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
Humanglomerularbasementmembraneantibogy,GBMELISAKit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclophosphamide,CTXELISA試劑盒人*(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨組織蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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