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更新時間:2017-07-05 10:19:49瀏覽次數(shù):132次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)線粒體膜蛋白提取試劑盒50T售后服務儲存條件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白溶解液室溫保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
線粒體膜蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取線粒體膜蛋白。提取過程簡單方便。制備的線粒體膜蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
線粒體膜蛋白提取試劑盒50T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
線粒體膜蛋白提取試劑盒50T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
大豆 Glycinemax(L.)merr Stigmasterol 豆甾醇 83-48-7 C29H48O ≥98%
硫醋軟骨速Chondroitinsulfctq20mg/支
和厚樸酚 Honokiol 35354-74-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法有關物質(zhì)檢查D-焦谷安酸100785-200701常溫,避光50mg
potewwium Benzoate (AS)本甲鉀標準品582-25-2 1g
215447-89-5 貝那普利相關物質(zhì)A標準品 15mg
安息香Styrax officinalis 安息香 579-44-2 C14H12O2 ≥98% 木糖(X0200000
六溴本標準品 蘆丁標準品 咯喹同標準品
*相關物質(zhì)B標準品72126-78-4 50mg*相關物質(zhì)B標準品
丹酚酸C 115841-09-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
龍血素A Loureirin A 20mg
異數(shù)李速-3-O—新*Isorhamnetin-3-O-Newhesperidin10mg
Rocaglaol ROCAGLAOL 147059-46-9
Calcium Stearate (AS)硬脂酸鈣標準品1592-23-02g硬脂酸鈣標準品
脫氫紫堇堿;Dexy7nocorydal 30045-16-0 20mg 訂購|咨詢
小鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒 ,英文名: MYH2 ELISA Kit
人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA檢測試劑盒Humangastrincellantibody,GCAELISAKit 96T/48T
大鼠細胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫試劑盒 Rat Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA kit
英文名稱RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心磷脂抗體CardiolipinIgA(ACAIgA)規(guī)格:96T/48T
過氧亞硝基陰離子解構劑FeTMPyPpentachloride1毫升
ELISAKitPBP/CXCL7人血小板堿性蛋白規(guī)格:48T/96T
豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒
HumanAnti-proteinase3antibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancyclophilinA,CyPAELISA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織GSK3激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體膜蛋白提取試劑盒50T售后服務人基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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