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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;磷酸酶抑制劑2-8℃保存;細(xì)胞蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
細(xì)胞總蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol 豆甾-4,22-二烯-3BETA,6BETA-二醇 167958-89-6 C29H48O2 ≥95%
蘆丁LuDing20mg/支
漢黃芩素 Wogonin 632-85-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定* 100782-200401常溫,避光100mg
Tolazoline xy7nochloride 本甲唑啉鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品59-97-2 300mg
211-506-8 芐扶噻嗪雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 5mg
大豆鱗脂酰膽減Soybeanphosphatidylcholine100mg
Dexy7nochroMolaenin 20013-76-7
*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品287980-84-1 15mg*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
丁香醛 134-96-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*味 Labiatae Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo. Sesamoside 胡麻屬苷 117479-87-5 Cl7H24O12 ≥98%
異數(shù)李速Isorhcmnqtin20mg/支
丁溴酸東莨菪減;*減; 溴丁東莨菪減 Scopolamine butylbromide 149-64-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)品卷曲霉素0339-9802效價(jià)測定
Docosyl caffeate 加非酸二十二酯純度:>95%
小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒 ,英文名: NQO1 ELISA Kit
人胃粘液素(GM)ELISA檢測試劑盒HumanGastricMucin,GMELISAKit 96T/48T
大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
英文名稱RatTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ)規(guī)格:96T/48T
甘油(glycerol)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitPGR人孕同受體規(guī)格:48T/96T
豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cytokeratin fragment 21-1 (CYFRA21-1) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA試劑盒
humananti-nucleosomeantibodyIgG,AnuA-IgGELISAKit 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclin-D3ELISA試劑盒人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FYNT激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人間隙連接蛋白(Cx)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司細(xì)胞蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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