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胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:15:56瀏覽次數(shù):144次

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公司供應(yīng)的胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法品種類齊全,檢測(cè)效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法紫珠Callicarpa giraldiana Stigmasta-4,22,25-trien-3-one 豆甾-4,22,25-三烯-3- 848669-09-0 C29H44O 95%

*速Tripdiolidq20mg/

亥茅酚苷 Sec-O-Glucosylhamaudol 80681-44-3 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

檢查用*雜質(zhì)1(4-[2-(3-乙基-2--吡珞啉-1-甲先胺基)乙基]100781-200501常溫,避光50mg

Fenbendazole

產(chǎn)品名稱:胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

本試劑盒提供全套試劑,適用于從細(xì)胞和動(dòng)物組織制備胞漿蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的胞漿蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測(cè)定等蛋白研究。

胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
胞漿蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
209414-27-7 依法韋侖相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

大馬 sativa 反式-2',3'-二輕-5'-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,1'-[1H]]-4,7'-二醇 69636-83-5 C15H20O3 95% 人抗D免疫球蛋 BRP (-20°C 運(yùn)輸(Y0000219

奧卡西產(chǎn)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品10mg

Cod Liver Oil維生素A、D標(biāo)準(zhǔn)品8001-69-21g

木香烴內(nèi)酯 553-21-9 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
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羥基*A xy7noxysafflor yellow A 78281-02-4 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定
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檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50/48

RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISA試劑盒大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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