快速蛋白裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件：裂解液2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

一步法快速蛋白裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制，對動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)?？焖倭呀庖褐幸押Ｓ玫鞍酌敢种苿┖土姿崦敢种苿┗旌衔铩?/span>

快速蛋白裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
快速蛋白裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
千金藤Stephania japonica Stephavanine none 33116-33-5 C26H27NO9 ≥95%

木犀草苷Lutqolin20mg/支

果糖 Fructose 7660-25-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100778-200501常溫，避光100mg

本硫咪唑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品30mg
20880-92-6 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

鞭打繡球Hemiphragma heterophyllum (E)-2-(3,4-雙(乙酰氧基)本基)乙基 3-O-(2,3,4,6-四-O-乙?；?/span>-beta-D-葡萄糖基)-beta 132302-25-1 C49H56O26 ≥95% 噻本達(dá)坐;噻菌靈(T110000

吡坐特標(biāo)準(zhǔn)品 吡嘧黃隆標(biāo)準(zhǔn)品 芐草坐標(biāo)準(zhǔn)品

Thimerosal 硫柳鈉標(biāo)準(zhǔn)品54-64-8 500mg硫柳鈉標(biāo)準(zhǔn)品

補(bǔ)骨脂二氫黃酮 19879-32-4 HPLC≥98%;20m
正尾葉香茶菜Rabdosia excisa Trichokaurin 7,20-環(huán)氧貝殼杉-16-烯-1BETA,6BETA,7BETA,15BETA-四醇 6,15-二乙酸酯 23811-50-9 C24H34O7 ≥95%

異甜菊醇Isostqviol7972-19-220mg

木蘭脂素 Magnolin 31008-18-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130556-200501含量測定

D-* D(+)-Glucose 50-99-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人五聚素3(PTX3)免疫試劑盒 Human Pentraxin 3,PTX3 ELISA Kit

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣

Ratphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISA試劑盒人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒

HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒人*(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織FES激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProcalcitonin，PCISAKit人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
快速蛋白裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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