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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法儲存條件:試劑AB 和Folin-Ciocalteu 試劑4℃保存。蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20°C 保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
在堿性條件下,蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅結(jié)合生成復(fù)合物,Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被復(fù)合物蛋白質(zhì)中的*和苯*殘基還原,產(chǎn)生深藍(lán)色,在一定的條件下,藍(lán)色深度與蛋白的量成正比,可根據(jù)750nm的光吸收值大小計(jì)算蛋白質(zhì)的含量。
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin A 黃花香茶菜甲素,黃花甲素,大萼變型甲素 85287-60-1 C20H24O6 ≥97%
人參二醇PcncxcdiolHPLC≥98%,20mg/支
川芎嗪;* Chuanxiongzine 1124-11-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材人工虎骨121536-200501TLC法鑒別
TRIGONELLINE xy7noCHLORIDE 鹽酸胡蘆巴堿純度:>95%
177530-93-7 外消旋依法韋侖標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
醋醋*TriamcinolonePuRuilin15mg/支
3(20)-Phytene-1,2-diol 438536-34-6
Lutein 葉黃素標(biāo)準(zhǔn)品1ml
竹節(jié)參皂苷ⅣA 51415-02-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
知母Anemarrhena asphodeloides Bge. Timosaponin A1 知母皂苷A1 68422-00-4 C33H54O8 ≥98%
油醋Olqicccid11-80-120mg
毛萼結(jié)晶甲 Maoecrystal A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用S-*100894-200701常溫,避光30mg
3,4,5-三??鼘幩?/span> 3,4,5-Tricaffeoylinoneic acid 86632-03-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 Human ICAM-3 ELISA Kit
脯酸(PRO)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
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humanhypotheticalproteinLOC677340ELISA試劑盒人假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗流行性出血熱(EHFAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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