蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費(fèi)代測
儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。

有效期：兩年。

產(chǎn)品簡介：

本蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。此抑制劑混合物適用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織中提取蛋白，直接加入任何蛋白裂解液中，均能有效抑制蛋白酶的活性，更高效的提取目的蛋白。適用于WesternBlot和免疫共沉淀等。

蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
香紫蘇 Salvia sclarea L. Sclareolide 香紫蘇內(nèi)酯 564-20-5 C16H26O2 ≥98%

柴胡皂苷DScikoscponinDHPLC≥98%，20mg/支

朝藿定B;羊霍定B Epimedin B 110623-73-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100698-200501常溫，避光100mg

Valproic Acid 丙戊酸標(biāo)準(zhǔn)品99-66-1 500mg
17560-51-9 Metolazone標(biāo)準(zhǔn)品 80mg

云南松Pinus yunnanensis 15,18-二輕基阿松香-8,11,13-三烯-7-同 213329-45-4 C20H28O3 ≥95% 肌酸靈酸鈉0 8601

*鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品134-80-5200mg

Tolazamide 妥拉磺脲標(biāo)準(zhǔn)品1156-19-0 200mg

柴胡皂苷C 20736-08-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
* 1124-11-4 檢測用對(duì)照品 2,3,5,6-*磷酸鹽

柚Citrus maxima Marmin 7-[[(2E,6R)-6,7-二輕基-3,7-二甲基-2-心烯-1-基]氧基]-2H-1-本并-2-同 14957-38-1 C19H24O5 蘆薈素016255

對(duì)照品苦杏仁苷110820-200403含量測定

Benzyl Benzoate本甲芐酯標(biāo)準(zhǔn)品120-51-45g本甲芐酯標(biāo)準(zhǔn)品

商陸Phytolacca esculenta van Houtte Esculentoside E 商陸皂苷E 65649-36-7 C35H54O11 ≥98%
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