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更新時間:2017-07-04 14:28:01瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)品名稱:蛋白穩(wěn)定劑1ml實驗方法
儲存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
*,蛋白在高濃度時更不容易降解(>1mg/ml),在低濃度時(<0.1mg/ml)極易降解而失活,所以通常都會加入穩(wěn)定劑;另一方面,加入的蛋白蛋白穩(wěn)定劑也可以減少蛋白由于管壁吸附所造成的損失。
蛋白穩(wěn)定劑對蛋白類試劑有強大的保護作用,使稀釋的蛋白試劑在極低濃度下室溫保存穩(wěn)定12 個月以上。該試劑與低濃度BSA(1-2 mg/ml)協(xié)同作用,保護作用更強。本產(chǎn)品主要用于微孔板條的封閉穩(wěn)定、抗體稀釋液、封穩(wěn)液、蛋白稀釋液等。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schizantherin B 五味子酯乙 58546-55-7 C28H34O9 ≥98%
吳茱萸減qvodicminqHPLC≥98%;20mg/支
長春質減 Catharanthine 2468-21-5 20mg HPLC≥98% 暫無簡介
中藥對照藥材西藏棱子芹121527-200501TLC法鑒別
xy7noXYCITRIC ACID LACTONE, (-)- (-)-羥基檸檬酸內酯純度:>95%
17230-88-5 *標準品 200mg
檸檬醋Citricacid1977-9-920mg
(2,4-Dixy7noxypxenyl)eetonitnile (2,4-二輕基本基)以 57576-34-8
粘菌素鹽酸鹽 標準品 號:1264-72-8 100mg
甘草查爾酮B;Licochalcone 58749-23-8 20mg 訂購|咨詢
白樺 Betula alba L. Xylitol * 87-99-0 C5H12O5 ≥98%
柚皮甙二輕查爾同Ncringqninchclconqtwoxy7nogqn18916-17-120mg
石斛酚;石槲酚 Dendropxenol 108853-14-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定丁本酞101035-200901常溫,避光500mg
*;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二氫黃酮甙;*;二氫黃酮苷 Hesperidin 520-26-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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