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更新時(shí)間:2017-07-04 14:11:40瀏覽次數(shù):120次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
磷酸化蛋白富集試劑盒50T售后服務(wù)產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
磷酸化蛋白富集試劑盒是利用磷酸基團(tuán)與金屬的親和力,采用固定化金屬螯合層析(IMAC)的方法富集磷酸化蛋白??梢赃x擇性的對(duì)磷酸化蛋白和多肽進(jìn)行富集和純化。
本試劑盒可以用來(lái)提取富集哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織、細(xì)菌、酵母、植物等樣本的的磷酸化蛋白。經(jīng)本試劑盒制備的蛋白樣品可用于Western blotting, mass spectrometry, 2D-PAGE 和protein arrays等下游應(yīng)用。
磷酸化蛋白富集試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
磷酸化蛋白富集試劑盒50T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
八角楓Alangium chinese Salicyl alcohol 水楊醇 1990-1-7 C7H8O2 ≥95%
肉桂醋CinncmicccidHPLC≥98%;20mg/支
補(bǔ)骨脂二輕黃同甲迷;甲基補(bǔ)骨脂黃同A Bavachinin A 19879-30-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材山柰121504-200401TLC法鑒別
CHEBULINIC ACID 訶子林鞣酸純度:>90%
155213-67-5 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
硫醋小檗減Berberinesulfate633-66-9HPLC≥98%;20mg/支
5-EpilithosperMoside 5-表紫草青苷 84799-31-5
Thiothixene替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品3313-26-6 250mg替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品
*;wo7ium ferulic 24276-84-4 20mg 訂購(gòu)|咨詢
蓮心堿 2586-96-1 檢測(cè)用對(duì)照品 無(wú)
羽裂勁直酒草Conyza stricta (Z)-毛葉醇內(nèi)酯 81122-95-4 C10H10O2 ≥95% 土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--紫色土(G07414(ASA-
對(duì)照品對(duì)羥基本甲乙酯100847-200501含量測(cè)定(內(nèi)標(biāo))
長(zhǎng)春瑞賓相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg長(zhǎng)春瑞賓相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
刺柏Juniperus formosana Deoxypodophyllotoxin 去氧*,去氧鬼臼脂素 19186-35-7 C22H22O7 ≥96%
小鼠X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)ELISA試劑盒 ,英文名: XBP1 ELISA Kit
人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit
英文名稱RatCCL24ELISAKit大鼠CCL24規(guī)格:96T/48T
口香糖*比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitDPT人皮膚蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glucocorticoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒
HumanTri-iodothyronine,T3ELISAKit 人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancoagulationfactorⅦ,FⅦELISA試劑盒人*Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙?;?/span>7(HDAC7)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanretinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化蛋白富集試劑盒50T售后服務(wù)人*受體(TR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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