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總蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法

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總蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購(gòu)!

總蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

總蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等動(dòng)物組織中提取總蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

總蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
總蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
小麥 Triticum aestivum L. beta-Sitosterol β-谷甾醇 19044-06-5 C29H50O 98%

馬錢苷McQicngcn20mg/

比枯枯靈;畢靈(),荷包牡丹減;三烏龜減 Bicuculline 485-49-4 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材白蘞121498-200501TLC法鑒別

DIDEOXYFORSKOLIN, 1,9- 福斯高林1,9-二脫氧純度:>95%
152943-33-4 言安他酮雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品(避光),(+4,+4)(危險(xiǎn)品) 40mg

銀杏葉Ginkgo biloba Leaf P.E. 果內(nèi)酯 33570-04-6 C15H18O8 98% * - 對(duì)照譜圖(Y0000215

CMMP標(biāo)準(zhǔn)品 CNA標(biāo)準(zhǔn)品 CNP標(biāo)準(zhǔn)品

Granisetron xy7nochloride *標(biāo)準(zhǔn)品107007-99-8 150mg

鞣花酸 476-66-4 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
10-脫乙酰巴卡亭 10-DAB (98%,HPLC) 32981-86-5 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

玉蘭Magnolia denudata 望春玉蘭同 A 116424-69-2 C21H24O6 95% 膦鈉六水合物(F0 89000

對(duì)照品*100257-200002含量測(cè)定

Fumaric Acid 富馬酸標(biāo)準(zhǔn)品110-17-8 200mg富馬酸標(biāo)準(zhǔn)品

白樺 Betula alba L. Betulin 白樺脂醇 473-98-3 C30H50O2 98%
大鼠血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人?;囸I素(AG)免疫試劑盒 Human acylated ghrelin,AG ELISA Kit

多酚氧化酶(PPO)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50/24

Ratmyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒

Humanplacentalribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCiliaryNeurotrophicFactor,CNTFELISA試劑盒人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

*(leucine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20

humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISAKitS100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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