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更新時(shí)間:2017-07-04 14:04:43瀏覽次數(shù):148次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法黃連 Chinese goldthread (-)-Stulopine 四氫黃連堿 4312-32-7 C19H17NO4 ≥98%
紫云英苷cstrcgclinHPLC≥98%;20mg/支
貝母素甲;貝母甲素 Peimine 23496-41-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材龜甲(腹甲)121494-200401TLC法鑒別
STIGMASTEROL 豆甾醇純度:>95%
產(chǎn)品名稱:膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動(dòng)物組織中分步提取膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說,也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
151767-02-1 *標(biāo)準(zhǔn)品 150mg
葫蘆巴減鹽醋鹽;鹽醋葫蘆巴減Trigonellinexy7nochloride;trigonellinexy7nochloride6138-41-6HPLC≥98%,20mg/支
(+)-Puerol B 2"-O-glucoside (5R)-4-[2-(BETA-D-葡萄糖基氧基)-4-甲氧基本基]-5-[(4-輕基本基)甲基]-2(5H)-呋喃同 868409-19-2
Lactic Acid 乳酸標(biāo)準(zhǔn)品50-21-5 1.5ml×3ampule
遠(yuǎn)志 Polygala tenuifolia Willd. Tenuifolin 細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷 20183-47-5 C36H56O12 ≥98%
愈創(chuàng)木酚Guciccol1990-2-120mg
*;四輕巴馬汀;延胡索乙素 Rotundine 10097-84-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定*100870-200801常溫,避光100mg
新苦參酮 Norkurarinone 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠血管細(xì)胞粘附分子(VCAM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: VCAM-1 ELISA Kit
人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAdenovirusIgM,ADV-IgMELISAKit 96T/48T
大鼠F-肌動(dòng)蛋白免疫試劑盒 Rat F-actin ELISA Kit
CLIAKitforSLPI(Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor)ELISAKit人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子規(guī)格:48T/96T
軟組織固著液(Bouin固著液)50毫升
ELISAKitbFGF-9人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9規(guī)格:48T/96T
小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat leptin (LEP) ELISA Kit 大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCholicacid,CAELISA試劑盒人膽酸(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
總L-高半*(Hcy)定量檢測(cè)試劑盒50次
Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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