支原體檢測(cè)試劑盒20T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：支原體檢測(cè)試劑盒20T售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

支原體是一種大小僅為0.2~0.3μm，無細(xì)胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45μm）的原核生物，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%，因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。當(dāng)細(xì)胞（特別是傳代細(xì)胞）被支原體污染后，細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變，而細(xì)胞的生長(zhǎng)率一般并未發(fā)生顯著的影響，因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，狀態(tài)不好。

支原體檢測(cè)試劑盒20T售后服務(wù)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
支原體檢測(cè)試劑盒20T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
蕓香 Ruta graveolens L. Rutin,Quercetin 3-O-β-D-rutinoside 蘆丁 153-18-4 C27H30O16 ≥98%

仙茅苷CurculigosidqHPLC≥98%，20mg/支

杯莧甾同 Cyasterone 17086-76-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材全葉青蘭121493-200501TLC法鑒別

STIGMASTEROL 豆固醇純度：>95%
151213-15-9 莫西沙星相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

檸檬 Citrus limonia Osbeck 檸檬酸 77-92-9 C6H8O7 ≥98% 葉綠素A(需干運(yùn)輸0 461A

伐蟲米言酸鹽標(biāo)準(zhǔn) 伐滅靈標(biāo)準(zhǔn)品 放現(xiàn)同菌標(biāo)準(zhǔn)品

Valsartan *標(biāo)準(zhǔn)品862-53-4 350mg

人參皂苷F1 53963-43-2 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
水杉Metasequoia glyptostroboides Sequosempervirin D 北美紅杉素D 864719-19-7 C21H24O5 ≥95%

鳶尾苷Tqctoridin20mg/支

地黃苷A;地黃甙A Rehmannioside A 81720-05-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)品粘菌素130327-200305效價(jià)測(cè)定

Caryophyllene 石竹烯純度：>95%
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