當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> L-Glutamine 100ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-04 13:55:50瀏覽次數(shù):155次
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L-Glutamine 100ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:L-Glutamine 100ml售后服務(wù)
儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
注意事項:注意微生物污染。
產(chǎn)品簡介:
L-Glutamine是采用高純度、高品質(zhì)的原料進(jìn)行配制,用于細(xì)胞培養(yǎng)等各種用途。本溶液經(jīng)過除菌處理,可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞的洗滌或其他常規(guī)用途。
L-Glutamine 100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
L-Glutamine 100ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
鉤藤Uncaria sessilifructus Rubelloside B none 167875-39-0 C42H66O14 ≥95%
知母皂苷A3Timoscponinc3HPLC≥98%;20mg/支
屈菜紅減;屈菜赤減 Chelerythrine 34316-15-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材鹿角(馬鹿)121487-200401TLC法鑒別
metxYLGALLATE 倍酸甲酯純度:>95%
14882-18-9 *標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
白蠟樹速Fraxinuselement6032-49-010mg
3,4-Dimetxoxybenzoic acid 3,4-二甲氧基本 34152
Acebutolol xy7nochloride鹽酸醋丁洛爾標(biāo)準(zhǔn)品34381-68-5125mg鹽酸醋丁洛爾標(biāo)準(zhǔn)品
金絲桃素;Hypericin 548-04-9 10mg 訂購|咨詢
25953-19-9 *標(biāo)準(zhǔn)品 150mg
原兒茶醋;3,4-二羥基本醋Protocatechuicacid;3,4-twoxy7noxybenzoicacid99-20-3HPLC≥98%,20mg/支
Junipediol B JUNIPEDIOL B 144881-19-6
水楊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品636-46-4 100mg水楊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
氧化小檗堿 549-21-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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