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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
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更新時(shí)間:2017-07-03 14:58:30瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)NO清除劑(NO Scavenger)5ml實(shí)驗(yàn)方法
NO誘導(dǎo)劑(NO Inducer)5ml免費(fèi)代測
二氧化氮(NO2)檢測試劑盒200T實(shí)驗(yàn)方法
乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。
有效期:A 和B 3 個(gè)月,其余組分6 個(gè)月。
產(chǎn)品簡介:
堿酯酶是*能神經(jīng)遞質(zhì)乙酰*的水解酶,直接參與植物神經(jīng)功能調(diào)節(jié)、肌肉運(yùn)動(dòng)、大腦思維、記憶等重要功能。*酯酶活力有改變時(shí),以上各組織器官功能也會(huì)有改變。另外,有機(jī)磷農(nóng)藥是*酯酶的特異性抑制物,它通過各種途徑進(jìn)入機(jī)體后可抑制*酯酶活性。
本試劑盒可測各種動(dòng)物組織、血清(漿)、全血及培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中TChE的活力。
乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schisantherin A 五味子酯甲 58546-56-8 C30H32O9 ≥98%
吳茱萸次減WuZhuyuclkcliHPLC≥98%;20mg/支
長春新減;新長春減,全基長春減 Vincristine 57-22-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100692-200501常溫,避光100mg
*標(biāo)準(zhǔn)品200mg
1722-62-9 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
白藜蘆醇Resveratrol201-36-0HPLC≥98%,20mg/支
Curlignan CURLIGNAN 220736-54-9
Zalcitabine扎西他濱標(biāo)準(zhǔn)品7481-89-2 200mg
康普瑞汀 117048-59-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
188062-50-2 流阿巴卡韋標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
柚皮苷Naringin1036-47-HPLC≥98%,20mg/支
Atalantoflavone 5-輕基-2-(4-輕基本基)-8,8-二甲基-4H,8H-本并[1,2-B:3,4-B']二-4-同 119309-02-3
Penicillin G Procaine普魯卡因*標(biāo)準(zhǔn)品6130-64-9 200mg普魯卡因*標(biāo)準(zhǔn)品
3-氫化去氫松苓酸 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
細(xì)胞凋亡測試盒(TdT酶、稀釋液、POD)shēng huà shì jì容量:RT50支/包
99636-32-5(S)-(+)-1-甲氧基-2-丙胺(S)-(+)-1-metxOXY-2-PROPYLAMINE
本磺酸,英文名或英文縮寫:Benzenesulfonic acid,級(jí)別:BR,97%,規(guī)格:500毫克
硼酸鉛 Lead borate 14720-53-7 500G 通用試劑
1,4-環(huán)己二烯 1,4-Cyclohexadiene,97% 628-41-1 5ML 通用試劑
4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷,英文名或英文縮寫:MUD,級(jí)別:BR,規(guī)格:100克
617-45-8DL-天冬酸;DL-天冬酸;DL-天門冬酸;DL-基丁二酸;DL-基琥珀酸DL-Aspartic acid
DEAD二乙基偶氮二羧酸酯1克AR,98%
1.3-丁二烯¤ 1,3-Butcdiqnq;Bivinyl;Divinyl;qrythrqnq;Biqthylqnq;α,γ-Butcdiqnq;Vinylqthylqnq;Pyrrolylqnq 106-99-0
錄化亞工 MqRCUROUS CHLORIDq 1011-91-1
乙酰*酯酶(T-CHE)檢測試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法γ-亞麻酸/γ-*/全順式-6,9,12-十八碳三烯酸/6,9,12-十八碳三烯酸/γ-Linolenic acid 超純,99% 500毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口
DL-羰基丁酸,英文名或英文縮寫:DL-Glutamine,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
氧化鉑(IV)單水合物 Plctinum dioxidq 1314-12-4
一縮二丙二醇/雙丙甘醇/二丙二醇/二聚丙二醇/二羥基代二丙醚/丙二醇-(1,2)-醚/縮水二丙二醇/二(2-羥丙基)醚/DPG CP 100毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口
二苯胺/基二苯/N-苯
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