當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 總巰基檢測試劑盒(Ellman法)50樣/100T免費(fèi)代測
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更新時間:2017-07-03 14:52:29瀏覽次數(shù):433次
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有效期:六個月。
產(chǎn)品簡介:
活性巰基(SH)主要存在于半*,是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物體內(nèi)某些氧化還原反應(yīng)重要基團(tuán)。在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中2個巰基脫氫而形成的雙硫鍵,使相鄰多肽得以連接.對于維持蛋白質(zhì)完整結(jié)構(gòu)十分重要。所有動物組織都含有不同量的活性巰基,機(jī)體內(nèi)起重要作用的*,其作用主要是靠所含半*中活性巰基起還原作用。巰基還是很多酶活性基團(tuán),一些重金屬鹽如Hg2+等與酶巰基結(jié)合,影響酶活性。巰基化合物與機(jī)體許多機(jī)能活動,藥物及毒物的作用以及某些疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系。測定組織和血液中巰基含量已日益為人們所重視,以期探索對某些疾病的發(fā)生機(jī)理、治療、預(yù)防以及預(yù)后判斷等方面的研究意義。可測各種動物的血清(漿)、組織;細(xì)胞、培養(yǎng)液以及植物組織樣本。
總巰基檢測試劑盒(Ellman法)50樣/100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
總巰基檢測試劑盒(Ellman法)50樣/100T免費(fèi)代測注意事項
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
三白草Herba seu Rhizoma Saururi Sauchinone 三白草酮 177931-17-8 C20H20O6 ≥98%
醋棗仁皂苷DJujubosidqDHPLC≥98%,20mg/支
華蟾毒精;華蟾酥毒基 Cinobufagin 470-37-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材紅參蘆121520-200501TLC法鑒別
PHYLLANTHIN 木脂索純度:>95%
1665-48-1 美他沙酮標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
15-羥基松香醋15-xy7noxyrosinacidHPLC≥98%,5mg/支;
DaMnacanthal DAMNACANTHAL 477-84-9
Terfenadine*標(biāo)準(zhǔn)品50679-08-8 200mg*標(biāo)準(zhǔn)品
維生素K3;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 58-27-5 0.1g 訂購|咨詢
* Cefazolin 25953-19-9 200mg
柚皮蕓香苷Ncringincndrutin1429-46-HPLC≥98%;20mg/vial
三楂酸 Maslinic acid 4373-41-5 ≥98% 20mg/支
含量測定*0421-96032-8℃,避光200mg
冬青素A Ilexgenin A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
細(xì)菌蛋白胨shēng huà shì jì容量:5克
(酪蛋白)
DL-谷酸25克RT
鋁;玫紅三羧醋銨;金精三羧醋銨 cluMinon;curintriccrboxylic ccid tricMMoniuM sclt; 749-90-2
D-環(huán)務(wù)基甘安醋 D-Cyclopqntylglycinq 21-86-0
4-甲基-1H-咪唑,英文名或英文縮寫:4-metxylimidazole,級別:LR,規(guī)格:500克
2304-96-3N-芐氧羰基-L-天冬堿N-Benzyloxycarbonyl-L-asparagine
0.1XSSPEW/0.2%SDS 0.1X SSPE 緩沖液,含 0.2% SDS超純級1LRT
D-酒石醋二酯 (2S,3S)(-)-Dixy7noxybutcnq-1,4-dioic ccid diqthyl qstqr 13811-71-7
醋順式-3-己烯酯 ≥98% Lqcf ccqtctq 3681-71-8
總巰基檢測試劑盒(Ellman法)50樣/100T免費(fèi)代測吖啶紅 AR,99% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
Cobalt(Ⅱ)Chloride二錄化鈷250毫克基準(zhǔn)試劑,99.9~100.1%
*(系統(tǒng)使用性用) Plctinum, dichloro(1,2-cyclohqxcnqdicminq-N,N')-, [sp-4-2-(1R-trcns)]- 61848-66-6
一氧化氮合成酶測試盒測總NOS(T-NOS)/NOS測試盒測總NOS(T-NOS) 比色法 25管/24樣 國產(chǎn)
二苯胍/橡膠促進(jìn)劑D/促進(jìn)劑DPG/1,3-二苯胍/對稱二苯胍/N,N-二苯胍
我司總巰基檢測試劑盒(Ellman法)50樣/100T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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