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更新時間:2017-07-03 14:43:50瀏覽次數(shù):108次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書儲存條件: 2-8°C保存。
試劑瓶開蓋后各組份按要求保存條件。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
紅根草Salvia prionitis Salvisyrianone none 250691-57-7 C20H24O3 ≥95%
續(xù)隨二萜醇ContinuqdwiththqtwotqrpqnqclcoholsHPLC≥98%;20mg/支
蒼術(shù)同 Atractylon 6989-21-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定左羥丙派嗪100678-200401常溫,避光100mg
*相關(guān)物質(zhì)A標準品28328-53-210mg
15708-41-5 以兒按四乙酸鐵鈉標準品 200mg
補骨脂Psoralea corylifolia L. 補骨脂查耳同 28448-85-3 C21H22O4 ≥98% 美他嗪:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y000009
異菌脲標準品 牛津郡異柳靈標準 異柳靈標準品
Phosphate (AS)酸標準品7757-87-1 2g酸標準品
苦蘇花皂苷C 366814-42-8 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
84680-54-6 2,4-二錄本基-2-(-1H-咪唑)乙醇標準品 300mg
魚子蘭Chloranthus elatior 4-表可木酸 83945-57-7 C20H30O2 ≥96% 甜茶內(nèi)酯167655
1.5g
Sumatriptan 舒馬曲坦標準品103628-46-2 50mg
保亭哥納香Goniothalamus griffithii Altholactone none 65408-91-5 C13H12O4 ≥95%
腺嘌呤鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:25克
91079-38-8蛋白胨Proteose peptone
阿姆斯特朗酸,英文名或英文縮寫:1,5- disulfonic acid,級別:高純,98%,規(guī)格:1克
對二甲基 4-(Dimethylamino),≥99.0% 100-10-7 25G 通用試劑
金/金粉/金海綿/金海棉/Gold 5N 1克 國產(chǎn)/進口
4-nitnopxenol對硝基酚5克BS,85%
GDX 104(聚二本多孔小球)NA
N-叔丁氧羰基-L-天冬酰,英文名或英文縮寫:Boc-L-asparagine,級別:BR,98.5%,規(guī)格:25克
1,2,4-本三羧臘酐 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22-30-7
每速 C MITOMYCIN C 1920-7-7
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書阿斯巴甜/阿司帕坦/糖肽/L-天冬酰-L-苯丙酸甲酯/蛋白糖/甜樂/甜味素/N-L-α-天冬酰-L-苯丙酸甲酯/Aspartame BR,99% 100克 國產(chǎn)/進口
VISIGLOAPCHEMILUMINESCENTSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學發(fā)光底物超純級透明無色液體COLDsigma
聚烯炳安 POLY(cLLYLcMINq) 30221-89-4
*(牛胰)/Trypsin(bovine pancreas) BR,1:250;250USP u/mg(1000BAEEu/mg), 25克
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