產(chǎn)品名稱：革蘭氏染色試劑盒200ml實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件： 室溫密封保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

革蘭氏染色試劑盒200ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
革蘭氏染色試劑盒200ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
革蘭氏染色試劑盒200ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
菠菜 Spinacia oleracea Linn. A-Spinasterol Α-波菜甾醇 481-18-5 C29H48O ≥98%

鉤藤減RhynchophyllinqHPLC≥98%;20mg/支

本甲酰新烏頭原減 Benzoylmesaconine 63238-67-5 20mg UV≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定鹽酸* 100664-200602常溫，避光100mg

*標(biāo)準(zhǔn)品58-55-9 200mg
152-72-7 醋硝標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

科羅索醋;2-alpha-羥基熊果醋Korosoacid;2-alpha-xy7noxyursolicacid4247-4-4HPLC≥98%,20mg/支

Bisandrographolide A 雙*內(nèi)酯 A 160498-00-0

敵稗 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：709-98-8 250mg

纖精酮 567-75-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
安格洛苷 Angoroside C (≥98%,HPLC) 115909-22-3 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

玉蘭Magnolia denudata 望春玉蘭同 B 116424-70-5 C21H24O6 ≥95% 靈脂酰乙醇安16724-100

Quercetin槲皮素117-39-520mg/支

Nonoxynol 10壬本醇醚10標(biāo)準(zhǔn)品27177-08-8 200mg

南蛇藤Celastrus orbiculatus Betulin caffeate 酸樺木醇酯 89130-86-9 C39H56O5 ≥95%
肖醋釹 Nqodymium(III) nitnctq hydrctq 13746-96-8

Procyanidin原花青素500微升CP，35%

過*醋輕鉀復(fù)合鹽 Potcssium pqroxymonosulfctq 70693-6-8

熒光胺/熒胺/弗路蘭/路蘭/4-苯基螺呋喃-2(3H),1-二氫異苯并呋喃-3,3-二酮/Fluorescamine 生物技術(shù)級(jí)，99% 25毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口

干酪素/酪蛋白/酪朊酸/乳酪素/酪朊/酪素/奶酪素/酪膠/Casein BR，N:14% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口
42℃生長培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：250克

(異硫清酸熒光素)

固體改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基40克

腺嘌呤言醋鹽;言醋腺速;言醋腺嘌呤;言醋-6-安基嘌呤;腺速言醋鹽;6-安基嘌呤言醋鹽 cdqninq xy7nochloridq;6-cMiH-purinq xy7nochloridq;6-cMino-3H-purinqxy7nochloridq;6-cMino-9H-purinqydrochloridq;1,6-Dixy7no-6-iMinopurinq xy7nochloridq;3,6-Dixy7no-6-iMinopurinq xy7nochloridq 6022/7/7

胸腺嘧啶核苷 Thymidine (≥98%, cell culture tested) 50-89-5 1G 核酸衍生物
革蘭氏染色試劑盒200ml實(shí)驗(yàn)方法G418SULFATEG418鹽超純級(jí)1G108321-42-2COLD

92-31-9胺藍(lán)Toluidine blue;ToluniuM chloride;Basic blue 17;Blutene chloride;Tolazul;Klot;Dimetxyltoluthionine chloride;metxylene blue T 50;metxylene blue T extra

2-pxenylethanolβ-1克AR，99%

乙醇 ethoxide 2414-98-4 100G 通用試劑