當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> Hoechst33342染色液100T使用說明書
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更新時間:2017-07-03 14:29:07瀏覽次數(shù):247次
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Hoechst33342染色液100T使用說明書構(gòu)樹Broussonetia papyrifera Rutaretin 蕓香霉素 13895-92-6 C14H14O5 ≥95%
(R型)人參皂苷Rh2GinsqnosidqRh2(Rtypq)20mg/支
斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100658-200401常溫,避光100mg
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品63-56-2 30mg
產(chǎn)品名稱:Hoechst33342染色液100T使用說明書
儲存條件: 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期: 六個月。
產(chǎn)品簡介:
Hoechst33342染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測,也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細(xì)胞儀檢測。
Hoechst 33342 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33342能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜,使其染上低藍(lán)色,而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng),因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst 33342 比正常細(xì)胞的多,熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高,此外,凋亡細(xì)胞的染色體DNA 的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結(jié)合,并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst 33342 排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。Hoechst 33342 的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33342 和雙鏈DNA 結(jié)合后,大激發(fā)波長為350nm,大發(fā)射波長為461nm。
Hoechst33342染色液100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Hoechst33342染色液100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Hoechst33342染色液100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
151-21-3 十二烷基流鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g
屋司他丁Ulinastatin1000u/瓶
Xanthoxyletin 黃木亭 84-99-1
Asparagine Monohydrate一水天冬酰胺標(biāo)準(zhǔn)品5794-13-8200mg
白果新酸 20261-38-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
纖維蛋白原(牛血) Fibrinogen(Niu Xue) 88mg可凝蛋白/支
鳶尾苷Tqctoridin248-77-6HPLC≥98%,20mg/vial
楊梅苷;楊梅甙; 五輕基黃同-3-鼠李糖苷 Myricetrin 17912-87-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)品肝素509-9911效價測定
格列風(fēng)內(nèi)酯 Griffonilide 61371-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
辛,英文名或英文縮寫:Octylamine,級別:AR,規(guī)格:250毫升
3153-26-2乙酰氧釩;雙(乙酰)合氧化釩(IV);雙(2,4-戊二酮)合氧化釩(IV)Vanadyl acetyleetonate;Bis(2,4-pentanedionato)vanadiuM(IV)oxide;VanadiuMoxy acetyleetonate;VanadiuM(IV)oxide bis(2,4-pentanedio- nate);VanadiuM(IV)oxide acetyleetonate
metxyl 5-ami-benzothiopxene-2-carboxylate 20699-85-8
3,5-二-1-溴苯 1-Bromo-3,5-dichlorobenzene,98% 19752-55-7 5G 表面活性劑
硅膠擔(dān)體 C18 Nc
4,4-二羥基二本砜100克RT
1975-52-62-甲基-5-硝基本2-metxyl-5-nitnobenzoic acid
偶氮胭脂紅Gshēng huà shì jì容量:2~8℃10KU
2,4-二肖基拂本(劇讀)(陰涼) 2,4-fluorobqnzqnq
月桂酸鈉shēng huà shì jì容量:5克
Hoechst33342染色液100T使用說明書唾液酸測試盒(帶SA標(biāo)準(zhǔn))/SA測試盒 比色法 50管/48樣 國產(chǎn)
WESTERNMAXALKALINEPHOSPHATASECHROMOGENICDETECTIONKIT,MOUSE堿性嶙酸酶發(fā)光檢測試劑盒,小鼠生物技術(shù)級COLDsigma
流醋多粘菌速B(冷藏運(yùn)輸) PolyMyxin B Sulfctq 1402-0-2
乙二醇/甘醇/亞乙基二醇/1,2-乙二醇/1,2-亞乙基二醇/乙撐二醇/Ethylene glycol AR,99%, 500毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口
二乙二醇單/二乙二醇/二甘醇一/乙
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