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更新時間:2017-07-03 14:14:23瀏覽次數:146次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網產品名稱:Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測
儲存條件: 2-8℃避光保存。
有效期:一年。
產品簡介:
細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。
AlamarBlu是一種氧化還原指示劑,能根據代謝活性產生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性,而在還原狀態(tài)下,轉變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產物,其吸收峰為530-560nm,而散射峰為590nm。在細胞增殖過程中,細胞內NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,處于還原環(huán)境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計或熒光光度計進行檢測,吸光度和熒光強度與活性細胞數成正比。這種染料經過驗證安全無毒,用于細胞活性和細胞增殖的定量分析以及細胞因子生物測定和體外細胞毒性研究。 這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉換成熒光和比色指示劑的能力。 受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性,因此對應的信號較低。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
三七pseudo-ginseng R-Notoginsenoside R2 R-三七皂苷R2 C41H69O13 ≥98%
升麻醇-3-O-β-D-木糖苷#NAMEHPLC≥98%;10mg/支
果內酯 Bilobalide 33570-04-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
鑒別用安丁三醇100643-200501常溫,避光100mg
Estriol雌三醇標準品50-27-1100mg
145546-80-1 多奈哌齊A標準品 25mg
原花青速B2;原矢車菊速B2ProcyanidinB2;procyanidinB29106-49-8HPLC≥98%,5mg/支
NiMbin 印楝素 5945-86-8
炔螨特 標準品 號:2312-35-8 100mg
米托拉酮 87626-55-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
綿毛馬兜鈴 Aristolochia mollissima Hance Vanillic acid 香草酸 121-34-6 C8H8O4 ≥98%
原花青速Procnthocycnidins482--620mg
去甲異波爾定;去甲基異波爾定 Norisoboldine 23599-69-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
TLC法有關物質*雜質A100960-200801常溫,避光50mg
斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
猩紅S,英文名或英文縮寫:Ponceau S,級別:CP,50-60%,規(guī)格:5毫克
62086-04-8三扶甲磺酸亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE
CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質粒DNA純化試劑盒生物技術級RTsigma
反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑
磷酸氫/三水磷酸/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP,98% 500克 國產/進口
3-巰基-1,2-丙二醇,英文名或英文縮寫:1-Thioglycerol,級別:BR,98%,規(guī)格:250克
Maltose 100g/1kg原裝 Sigma M2250
Ammoniumiodide化铔5毫升AR,99%
本磺酰(*) Bqnzqnqsulfonyl hydrczidq 80-17-1
葡聚糖 T-500 (右旋... Dextran T-500 (分子量:500,000) 9004-54-0 10G 分離試劑
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測1,3-二甲基,英文名或英文縮寫:Theophylline,級別:高純,98%,規(guī)格:2KU
11138-49-1鋁酸鈉;偏鋁酸鈉wo7ium aluMinate;AluMinuM wo7ium oxide
wo7iumGluconate*高純級白色至微黃色精細結晶RTsigma
乙基黃原酸鉀 Potassium ethyl xanthogenate,96% 140-89-6 10G 通用試劑
四甲基硅烷 Tetramethylsilane,≥99.99% 75-76-3 25ML 通用試劑
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