WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T免費(fèi)代測儲存條件： 2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

WST-1是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。

WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
黃杜鵑RhododendronmolleG.Don Rhodojaponin II 鬧羊花素II 26116-89-2 C22H34O7 ≥98%

龍血速BLourqirinBHPLC≥98%;20mg/支

澳洲茄安;茄解啶、澳洲茄次減;茄解定 Solasodine 126-17-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定鹽酸*100634-200401常溫，避光50mg

Powdered Eleuthero Extract刺五加粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品84696-12-51.5g
144750-52-7 錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

菖蒲Acorus calamus (1R,3AS,4S,7R,8R,8AS)-十輕-1,4-二甲基-7-(1-甲基乙基)-4,8-環(huán)氧奧苷菊環(huán)-1-醇 911714-91-5 C15H26O2 ≥95% 異環(huán)靈酰安 雜質(zhì)F(I0060012

噻嗪同標(biāo)準(zhǔn)品 去草安標(biāo)準(zhǔn)品 牛津郡克蔓靈標(biāo)準(zhǔn)

wo7ium Ascorbate 抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品134-03-2 200mg抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品

D(十)-* 50-99-7 HPLC≥98%;100mg
地* Dirithromycin 62013-04-1 100mg

原人參三醇Rcwginsqngthrclcohol1423-93-6HPLC≥98%，20mg/vial

重樓皂苷VII;重樓皂甙VII Polyphyllin VII 76296-75-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品1219-0102含量測定

金松雙黃酮 Sciadopitysin 521-34-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
*5克

7646-79-9無水錄化鈷Cobalt chloride

1，5-奈二磺酸100克

異丙苯 Cumene hydroperoxide,80% 80-15-9 100ML 通用試劑

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑V601/偶氮二異丁酸二甲酯/紫外吸收劑V601/AIBME 高純，98% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
3-嶙酸甘油脫氫酶，英文名或英文縮寫：α-Glycerophosphate dexy7nogenase，級別：BR，300u/mg，芬末，規(guī)格：1克

129-96-4變色酸二鈉鹽;鉻變酸二鈉;4,5-二羥基-2,7-二磺酸二鈉鹽;1,8-二羥基-3,6-二磺酸二鈉鹽ChroMotropic acid diwo7ium salt;1,8-Dixy7noxy-3,6-disulfonic acid diwo7ium salt

L(-)Fucose6-脫氧-L-半乳糖5克高純，99%

3,5-二錄本安 3,5-Dichlorocnilinq 66-43-7

H-Pro-OMeoHClL-卟啉甲酯鹽酸鹽5克特純，98.5%
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T免費(fèi)代測CHYMOSTATIN*抑制劑超純級5MG9076-44-2Frozen

121412-77-9*(Z)-異構(gòu)體Cefprozil (Z)-IsoMer

DOX鹽酸*30KUBR

乙基纖維素 Ethyl cellulose,3-7.s 9004-57-3 50G 通用試劑

曲拉通 X-114 Triton X-114 (laboratory grade) 9036-19-5 100ML 通用試劑

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