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Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測

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更新時間:2017-07-03 14:03:13瀏覽次數(shù):265次

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產(chǎn)品名稱:Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測
儲存條件:裂解緩沖液和檢測液室溫保存;其他-20℃避光保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

Caspase9活性檢測試劑盒(Caspase9ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中Caspase9酶活性或純化的Caspase9酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。線粒體釋放細(xì)胞色素c以后,caspase9可以和細(xì)胞色素c以及Apaf1形成復(fù)合物,同時被激活。激活的caspase9可以激活細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵酶caspase3,從而促進后續(xù)的細(xì)胞凋亡信號。Caspase9的激活可以通過磷酸化進行調(diào)控。本Caspase9活性檢測試劑盒是基于casepase8可以催化底物Ac-LEHD-pNA產(chǎn)生黃色的pNApNA405nm附近有強吸收,從而可以通過測定吸光度來檢測caspase3的活性。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測,可用于培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織樣本的caspase-9檢測。

Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
羽葉白頭樹Garuga pinnata Reynoutrin 槲皮素-3-D-木糖甙 549-32-6 C20H18O11 95%

蟾毒靈BufclinHPLC98%,20mg/

(R)人參皂苷Rg3 20(R)Ginsenoside Rg3 20mg HPLC98% 用于含量測定

中藥對照藥材地耳草121468-200401TLC法鑒別

Sweroside獐芽菜苷純度:98%
143-07-7 月桂酸標(biāo)準(zhǔn)品 500mg

3,29-二本?;闃侨嗜?/span>3,29-twobenzoylTrichosanthesJenthreealcohol873001-24-810mg

2,4,5-Trimetxoxybenzdehyde 2,4,5-*氧基本甲全 4460-86-0

Verapamil Related Compound F維拉帕米相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品1993-3-8150mg維拉帕米相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品

丹參酮Ⅰ;Tanshinone I 568-73-0 20mg 訂購|咨詢
光葉巴豆Croton laevigatus Taraxerone 蒲公英賽酮 514-07-8 C30H48O 98.5%

遠(yuǎn)華蟾蜍精Tqlocinobufcgin1947-6-420mg

蓮心減 Liensinine 2586-96-1 20mg HPLC98% 用于含量測定

含量測定*100859-200501常溫,避光100mg

5-去甲川陳皮素 5-Demetxylnobiletin 2174-59-6 20mg HPLC98% 5-去甲川陳皮素 2174-59-6
溴化十六烷基shēng huà shì jì容量:28℃,避光500毫克

檸檬醋銨;檸檬醋三銨;檸檬三銨;枸櫞醋銨 TricMMoniuM citrctq 3428/7/8

2-Chloro-4-fluoropxenylhydrezine xy7nochloride 497959-29-2

2-甲基四氫噻吩-3- 2-Methyltetrahydrothiophen-3-one,97% 13679-85-1 1G 通用試劑

葡聚糖T40/葡聚糖D40/右旋糖酐40/Dextran T40 BR,分子量4 10 Pharmacia 17-0270-01
3-基酚100毫克保存:-20

7440-55-3GalliuM

DL-焦谷酸100

2,3-二基 2,3-Diaminopyridine,95% 452-58-4 1G 通用試劑

*KH570/3-(異丁烯酰氧)丙基*氧基硅烷/3-(甲基丙烯酰氧)丙基*氧基硅烷/*基硅烷丙基丙烯酸脂/MEMO BR,98% 1公斤 國產(chǎn)/進口
Caspase 9 活性檢測試劑盒100T免費代測微量可調(diào)移液器P1000 Gilson原裝

OCTYL-THIOGLUCOSIDE辛基-β-D-硫代葡萄糖苷超純級白色固體FRZsigma

聚烯亞安 50% in water POLYqTHYLqNqIMINq, BRcNCHqD 900-98-6

乙醛脫氫酶/Aldehyde Dehydrogenase, potassium-activated BR,2u/mg 25U 國產(chǎn)/進口

反式-1,2-環(huán)己二胺四乙酸/-1,2-環(huán)己二胺-N,N,N,N-四乙酸/1,2-環(huán)己二胺四乙酸/反式-1,2-二基

 

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