Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒50T使用說明書注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒50T使用說明書儲(chǔ)存條件：裂解緩沖液和檢測(cè)液室溫保存；其他-20℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Caspase9活性檢測(cè)試劑盒(Caspase9ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中Caspase9酶活性或純化的Caspase9酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。線粒體釋放細(xì)胞色素c以后，caspase9可以和細(xì)胞色素c以及Apaf1形成復(fù)合物，同時(shí)被激活。激活的caspase9可以激活細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵酶caspase3，從而促進(jìn)后續(xù)的細(xì)胞凋亡信號(hào)。Caspase9的激活可以通過磷酸化進(jìn)行調(diào)控。本Caspase9活性檢測(cè)試劑盒是基于casepase8可以催化底物Ac-LEHD-pNA產(chǎn)生黃色的pNA，pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收，從而可以通過測(cè)定吸光度來檢測(cè)caspase3的活性。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)，可用于培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織樣本的caspase-9檢測(cè)。

Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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遠(yuǎn)志 Polygala tenuifolia Willd. Senegenin 遠(yuǎn)志皂苷元 2469-34-3 C30H45CLO6 芥子酸(5764

中藥對(duì)照藥材錦燈籠121127-200502TLC法鑒別

Secoisolariciresinol diglucoside開環(huán)異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷純度：≥98%

葛藤Pueraria lobata Melilotigenin B (4beta)-23-羥基齊墩果-12-烯-3,22-二酮 91269-84-0 C30H46O3 ≥95%
溴化十四烷基*基，英文名或英文縮寫：TTAB，級(jí)別：AR，芬末，規(guī)格：1克

110-44-1山梨酸;1,3-戊二烯-1-羧酸;花楸酸;清涼茶酸Sorbic Acid (AS);1,3-Pentadiene-1-carboxylic acid

BRIJ35,10%SOLUTION,PEROXIDE-FREEBRIJ-35, 無過氧化物, 10%蛋白組學(xué)級(jí)無色液體RTsigma

碳酸氫鉀 Potassium bite (ACS,99.7%) 298-14-6 100G 通用試劑

(R)-(-)-2-基丁烷 (R)-()-sec-Butylamine,99% 13250-12-9 250MG 通用試劑
3-基本二甲酰10克

10421-85-92-錄扁桃酸2-Chloromandelic acid

六偏嶙酸鈉shēng huà shì jì容量：25克

2,4-二溴本酚 2,4-Dibromophqnol 612-28-7

鹽酸*shēng huà shì jì容量：25克
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒50T使用說明書Devarda'salloy德瓦達(dá)合金100克GR，98%

3078-34-06B-羥基可的松6BETA-xy7noXYCORTISOL

TIM丙糖嶙酸異構(gòu)酶100克超純，99%

乙醛肟 Acetaldoxime 107-29-9 25G 通用試劑

紫菀酮 Shionone (≥98%,HPLC) 10376-48-4 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品