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更新時間:2017-07-03 14:01:08瀏覽次數:275次
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產品名稱:Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務
儲存條件:裂解緩沖液和檢測液室溫保存;其他-20℃避光保存。
有效期:一年。
產品簡介:
Caspase3活性檢測試劑盒(Caspase3ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中Caspase3酶活性或純化的Caspase3酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase3也稱CPP32、Yama或apopain,有時被寫作caspase-3或caspase3,屬于caspase家族的CED-3亞家族(CED-3subfamily),是細胞凋亡過程中的一個關鍵酶。Caspase3是哺乳動物細胞中研究多的一個caspase。Caspase-3在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細胞發(fā)生凋亡階段,Caspase-3被激活,活化的Caspase-3由兩個大亞基和兩個小亞基組成,裂解相應的胞漿胞核底物,終導致細胞凋亡。Caspase3可以剪切procaspase3、6、7和9,并可以直接特異性剪切許多caspase底物,包括PARP,ICAD,gelsolin和fodrin等。這些由caspase3介導的蛋白剪切是細胞凋亡分子機制的重要組成部分。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
柚Citrus maxima Nootkatone 努特卡酮;諾卡酮,圓柚酮 4674-50-4 C15H22O ≥98%
棕櫚醋酯Pclmiticccidqthylqstqr68-97-720mg
鱧腸Eclipta prostrata alpha-Terthienylmetxanol alpha-三聯(lián)噻吩 13059-93-3 C13H10OS3 茶本海明(100120
中藥對照藥材路邊青121227-200503TLC法鑒別
Berbamine xy7nochloride*純度:≥98%
10191-41-0 維生素E標準品(250mg) 500mg
楊梅苷;楊梅甙;五羥基皇同-3-數李YangMeigan;YangMeidai;fivexy7noxyflavone-3-ShuLiMyricetriHPLC≥98%,20mg/支
Bi-linderone BI-LINDERONE 1227375-09-8
嘧啶并三唑類磺胺 標準品 號:219714-96-2 1ml
人參皂苷 Rg4 126223-28-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
烈香杜鵑 Rhododendron anthopogonoides 1g
紫杉葉3-O數李基醋酯Rhamnusmetxylesteryewleaves3-O9838-67-3HPLC≥98%,20mg/vial
5,7-Dixy7noxy-6,8-dimetxoxyflavone 5,7-DIxy7noXY-6,8-DImetxOXYFLAVONE 3162-45-6
UV法含量測定D-葡萄糖醛酸140648-200602常溫,避光100mg
異佛手柑內酯 Isobergapten 482-48-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
9(R)-HODE (50 ug) 9R-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
MA-CHMINACA (1 mg) AB-CHMINACA|AMB N-metxylcyclohexyl analog|MAB-AB-CHMINACA; metxyl (1-(cyclohexylmetxyl)-1H-indazole-3-carbonyl)-L-valinate
Annexin V-iFluor 350偶聯(lián)物 Annexin V-iFluor 350 conjugate
Docosaenoyl Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-13Z-docosenamide; Docosaenoyl Ethanolamide
α-Linolenic Acid (1 g) 9Z,12Z,15Z-octadecatrienoic acid; ALA; α-Linolenic Acid
4-(3-Ethenyl-3,7-dimetxyl-1,6-octadienyl)pxenol Bakuchiol
G-QGly-Gln
α-Mating Factor (1-6)Trp-His-Trp-Leu-Gln-Leu
[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide;Melanotan ⅠAc-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-NH2
Biotin-Obestatin (human)Biotin-Phe-Asn-Ala-Pro-Phe-Asp-Val-Gly-Ile-Lys-Leu-Ser-Gly-Val-Gln-Tyr-Gln-Gln-His-Ser-Gln-Ala-Leu-NH2
P69 (522-534), M. lepraePro-Glu-Lys-Thr-Ala-Ala-Pro-Ala-Ser-Asp-Pro-Thr-
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務錄本ChlorobenzeneAR500mL
G8140-5MLGoldview5ml0
CG5611-1Gγ-Globulins(From Bovine) γ-球蛋白(牛)9007-83-41g
2xPCRmix GC-Rich Master1ml(with Dye)
亮抑酶肽5mg
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