Annexin V-FITC/PI 雙染細胞凋亡檢測試劑盒20T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：Annexin V-FITC/PI 雙染細胞凋亡檢測試劑盒20T實驗方法
儲存條件：2-8℃避光保存。*保存于-20℃避光。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細胞中，磷脂酰*（PS）只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰*（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細胞膜表面的PS從而將這些程序性死亡的細胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應，而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。PS外翻發(fā)生在細胞核破裂，DNA化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得AnnexinV與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。

Annexin V-FITC/PI 雙染細胞凋亡檢測試劑盒20T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Annexin V-FITC/PI 雙染細胞凋亡檢測試劑盒20T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
柑橘屬 Citrus nobilis Lour. Nobiletin 川陳皮素 478-01-3 C21H22O8 ≥98%

知母皂苷A-ⅢTimoscponinc-III41029-79-420mg

景洪暗羅'Polyalthia cheliensis 6α,16,18-Trixy7noxycleroda -3,13-dien-15,16-olide 6ALPHA,16,18-三輕基克羅-3,13-二烯-15,16-內(nèi)酯 1017233-48-5 C20H30O5 醋酸潑泥松龍(100124

含量測定聯(lián)本芐唑100326-200201常溫，避光50mg

*相關(guān)物質(zhì)B標準品42017-89-0 25mg
100986-89-8 左氧扶沙星相關(guān)物質(zhì)B標準品 35mg

畢靈減Bicuculline482-49-420mg

Ferulic acid 反式阿魏酸 537-98-4

鹽酸*標準品5411-22-3200mg鹽酸*標準品

絞股藍皂苷XLIX;Gypenoside 94987-08-3 20mg 訂購|咨詢
土荊皮乙酸 Pseudolaric Acid B 分 子 量：432.4600 編號：82508-31-4 分子式：C23H28O8 別　　名：土槿皮乙酸;土荊乙酸 【基本用途】本品用于含量測定。

紫蘇Perilla frutescens (Linn.) Britt. Perillyl Alcohol 紫蘇醇 536-59-4 C10H16O 稀土球墨鑄鐵成分分析標準物質(zhì)(G01119a

供含量測定用喬松素111829-201001常溫，避光20mg

Mebendazole 達唑標準品31431-39-7 200mg

升麻 Cimicifuga foetida L. Isoferulic acid 異阿魏酸 537-73-5 C10H10O4 ≥98%
15-OxoEDE （25 ug）     15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE

α-（difluorometxyl）-DL-Arginine （5 mg）     DFMA|RMI 71897； 2-（difluorometxyl）arginine

Nuclear Red DCS1     Nuclear Red DCS1

Lignoceroyl Ethanolamide （10 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-tetracos*； Lignoceroyl Ethanolamide

5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide （500 ug）     N-（2-xy7noxyetxyl）-5Z，8Z，11Z-eicosatrienamide； Mead Acid Ethanolamide； 5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide

Dietxylenetriamine NONOate； DETA NONOate； （Z）-     NOC-18
gp120, HIV-1 MNTyr-Asn-Ala-Lys-Arg-Lys-Arg-Ile-His-Ile-Gln-Arg-Gly-Pro-Gly-Arg-Ala-Phe-Tyr-Thr-Thr-Lys-Asn-Ile-Ile

α-EndorphinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr

[Nle13, Glu14] Motilin, human, porcinePhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Nle-Glu-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

Biotin-Neurokinin BBiotin-Asp-Met-His-Asp-Phe-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2

P60c-src Substrate IIAc-Ile-Tyr-Gly-Glu-Phe-NH2
Annexin V-FITC/PI 雙染細胞凋亡檢測試劑盒20T實驗方法3,3,5-*基環(huán)己酮3,3,5-Trimetxylcyclohexanone

21888-25MG羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯 CFSE150347-59-425MG0

A0175-50GAlbumin Bovine,Fraction V,Salt-free form pH 5.1 牛血清白蛋白(低鹽)9048-46-850g

100bp Ladder250ul

Lecithin,from egg yolk5g