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Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)免費代測

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更新時間:2017-07-03 13:56:57瀏覽次數(shù):159次

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Androstenedione雄純度:≥98%

產(chǎn)品名稱:Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)免費代測
儲存條件:-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(CaspaseInhibitorZ-VAD-FMK)是一種不可逆的Caspase廣譜抑制劑,可以穿透細胞膜的泛Caspase抑制劑(Cellpermeablepancaspaseinhibitor),可以抑制由Caspase激活導致的細胞凋亡。Caspase抑制劑Z-VAD-FMK分子式為Z-Val-Ala-Asp-CH2F,C21H28FN3O7,分子量為453.5,純度>99%。Caspase抑制劑Z-VAD-FMK是一種常用的細胞凋亡抑制劑,常用于觀察特定的細胞凋亡是否通過Caspase激活來介導。

Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
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Hexanoyl Glycine 50 mg     NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine

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11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid 5 mg     11Z,14Z,17Z-eicosatrienoic acid; 11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid

3S,     Ryanodine
gp100 (476-485)Val-Leu-Tyr-Arg-Tyr-Gly-Ser-Phe-Ser-Val

α-Conotoxin IMIGly-Cys-Cys-Ser-Asp-Pro-Arg-Cys-Ala-Trp-Arg-Cys- NH2(Disulfide bridge: Cys2-Cys8, Cys3-Cys12)

[Met5,Arg6,Phe7] Enkephalin, amideTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe-NH2

Biotin-LC-Neurogranin (28-43)Biotin-LC-Ala-Ala-Lys-Ile-Gln-Ala-Ser-Phe-Arg-Gly-His-Met-Ala-Arg-Lys-Lys

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