當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡檢測>> 線粒體綠色熒光染色試劑盒BBcellProbe M18100T實驗方法
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更新時間:2017-07-03 13:55:04瀏覽次數(shù):143次
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(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
線粒體綠色熒光染色試劑盒BBcellProbe M18100T實驗方法儲存條件:2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
線粒體綠色熒光染色試劑采用MitoTrackerGreenFM綠色熒光染料,這種染料定位于線粒體的能力不受線粒體膜電位影響。該染料可以對活細胞進行染色,但是乙醛固定后不能穩(wěn)定保存。 MitoTracker Green FM 也可以用來對固定細胞的線粒體進行染色。
線粒體綠色熒光染色試劑盒BBcellProbe M18100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司線粒體綠色熒光染色試劑盒BBcellProbe M18100T實驗方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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竹節(jié)香附速ARcddqcninc8941-79-320mg
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Fenoprofen Calcium *標(biāo)準(zhǔn)品53746-45-5 500mg
10035-04-8 錄化鈣標(biāo)準(zhǔn)品 1g
10-氧基喜樹減10-metxoxycamptothecin20mg
Cedrusin CEDRUSIN 75775-36-9
西替利嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品246870-46-220mg西替利嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
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metxyl eichlerianate metxYL EICHLERIANATE 56421-12-6
抑芽丹 標(biāo)準(zhǔn)品 號:123-33-1 250mg
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β-Nicotinamide Mononucleotide (50 mg) β-NMN; 3-(aminocarbonyl)-1-(5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl)-pyridinium, inner salt
iFluor 680-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 680-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Pentadecanoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide
5(Z),8(Z),11(Z)-Eicosatrienoic Acid (5 mg) 5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; Mead Acid; 5(Z),8(Z),11(Z)-Eicosatrienoic Acid
N-Acetyl-5-metxoxytryptamine; NSC 113928; Regulin; NSC 56423 Melatonin
gp100 (177-186)Ala-Met-Leu-Gly-Thr-His-Thr-Met-Glu-Val
α-Conotoxin EIArg-Asp-Hyp-Cys-Cys-Tyr-His-Pro-Thr-Cys-Asn-Met-Ser-Asn-Pro-Gln-Ile-Cys- NH2
[Met5,Arg6,7,Val8,Gly9] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Arg-Val-Gly
Biotin-Kinase Domain of Insulin Receptor (2)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-pTyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys
P38 (411-425), M. lepraeAla-Gly-Gly-Gly-Val-Thr-Leu-Leu-Gln-Ala-Ala-Pro-Ala-Leu-Asp
線粒體綠色熒光染色試劑盒BBcellProbe M18100T實驗方法2,2-聯(lián)比啶2,2'-DipyridylAR1g
CA1021-1gABTS(2,2-連氮基-雙-(3-乙基本并二氫噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽)30931-67-01g0
P7125-10GProtein A *A
病毒DNA-RNA純化試劑盒50T
L-Ascorbic Acid100g
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