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吖啶橙染色試劑盒100T售后服務

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更新時間:2017-07-03 13:54:00瀏覽次數(shù):149次

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產(chǎn)品名稱:吖啶橙染色試劑盒100T售后服務
儲存條件:-20℃避光保存。

有效期: 一年。

產(chǎn)品簡介:

吖啶橙(AcridineOrange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNARNA染色。其激發(fā)波長為488nm,吸收波長為515nm。它與細胞中DNARNA結(jié)合量存在差別,復合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。

吖啶橙染色試劑盒100T售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
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β-Nicotinamide Mononucleotide 10 mg     β-NMN; 3-aminocarbonyl-1-5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl-pyridinium, inner salt

iFluor 594-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 594-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Pentadecanoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-pentadec* Pentadecanoyl Ethanolamide

13Z-Docosenoic Acid 500 mg     13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13Z-Docosenoic Acid

D-     Chlorampxenicol
GM-CSF (96-112)Cys-Ala-Thr-Gln-Ile-Ile-Thr-Phe-Glu-Ser-Phe-Lys-Glu-Asn-Leu-Lys-Asp

α-CGRP (31-37) (canine, mouse, rat)Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe- NH2

[Met5, Lys6, Arg7] a-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-Arg

Biotin-Intermedin (human)Biotin-Thr-Gln-Ala-Gln-Leu-Leu-Arg-Val-Gly-Cys-Val-Leu-Gly-Thr-Cys-Gln-Val-Gln-Asn-Leu-Ser-His-Arg-Leu-Trp-Gln-Leu-Met-Gly-Pro-Ala-Gly-Arg-Gln-Asp-Ser-Ala-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2

OxytocinCys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務乙基本etxyl-benzenAR500mL

CA1081S-5mg乙酰輔酶 A102029-73-25mg0

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