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更新時間:2017-07-03 13:32:58瀏覽次數(shù):144次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)品名稱:Rho123細(xì)胞膜電位檢測試劑盒50T實驗方法
儲存條件: RHO123 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 孵育緩沖液 2-8℃保存。
有效期:一年。
Rho123細(xì)胞膜電位檢測試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Rho123細(xì)胞膜電位檢測試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Rho123細(xì)胞膜電位檢測試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
水龍骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei (Kunze) J. Sm.的干燥根莖 Neoeriocitrin 新北美圣草苷 13241-32-2 C27H32O15 ≥98%
紫莖女貞苷BqupctoriumprivqtglycosidqB20mg
狼牙刺Sophora viciifolia 2,4,6,6-Tetrametxyl-3(6H)-pyridinone 2,4,6,6-四甲基-3(6H)-比啶同 203524-64-5 C9H13NO 單元素鋅溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080607
含量測定*100310-200201常溫,避光50mg
Perpxen Sulfoxide*亞砜標(biāo)準(zhǔn)品10078-25-8 100mg
(R型)人參皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 (≥98%,HPLC) Null 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
綿棗兒Scilla scilloides 3-(4-輕基本亞甲基)-5-輕基-7-甲氧基色滿-4-同 259653-54-8 C17H14O5 ≥95% 單心酸甘油酯(Y0000794
對照品*100472-200401HPLC法含量測定用
二類殘留溶劑-2-甲氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品109-86-4 (2-... 1.2ml×3ampules二類殘留溶劑-2-甲氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品
番紅花 Crocus sativus L. Crocin I 西紅花苷I; 94238-00-3 C44H64O24 ≥98%
牛磺酸 Taurine 107-35-7 20mg
棕櫚醋Palmiticacid109620mg
D-arabinitol D-阿拉伯糖醇 488-82-4
馬卡因高麗槐素19908-48-6Maackiain
山梔子苷B;Gardenoside 24512-62-7 20mg 訂購|咨詢
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 (25 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, 2-glyceryl ester; 2-AG-d8; 2-Arachidonoyl Glycerol-d8
CMP-Sialic Acid (wo7ium salt) (10 mg) CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-(xy7nogen 5’-cytidylate)-β-neuneminic acid, monowo7ium salt
AP-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml AP-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Benocyclidine-d10 (10 mg) 1-(1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl)-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-d10-pipeni7ine; BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10
Linoleoyl Ethanolamide (100 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide
(E)-N-xy7noxy-3-[3-(pxenylsulfamoyl)pxenyl]prop-2-enamide; Belinostat PXD101
Glucagon (1-29), bovine, human, porcineHis-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr
Xenopsin-Related Peptide 2 (XP-2)Phe-His-Pro-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu
[Leu8, Des-Arg9]-BradykininArg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Leu
Biotin-Angiotensin I, humanBiotin-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu
Orn8, Urotensin II, humanGlu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Orn-Tyr-Cys-Val
Rho123細(xì)胞膜電位檢測試劑盒50T實驗方法以兒按四乙酸二鉀Dipotewwium EDTAAR100g
CA1291-50g己二酸124-04-950g0
ER0542Msp I5x3000 units
QS Plasmid Maxi Kit10T
IPTG, Dioxane Free100g
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