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更新時(shí)間:2017-07-03 13:30:37瀏覽次數(shù):260次
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我司JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)儲(chǔ)存條件:JC-1-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位(mitochondrialmembranepotential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí),JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,488nm激發(fā)時(shí)的大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm,可以產(chǎn)生紅色熒光,在流式圖上表現(xiàn)為FL1和FL2雙陽(yáng)性;在線粒體膜電位較低時(shí),JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時(shí)JC-1為單體,488nm激發(fā)時(shí)大發(fā)射波長(zhǎng)為527nm,可以產(chǎn)生綠色熒光,形成流式圖中所有細(xì)胞FL1均為陽(yáng)性。凋亡細(xì)胞則大多為FL1單陽(yáng)性。這樣就可以非常方便地通過(guò)熒光顏色的轉(zhuǎn)變來(lái)檢測(cè)線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來(lái)衡量線粒體去極化的比例。通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè)。試劑盒染料與其他的陽(yáng)離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123相比,特異性更高,對(duì)線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化,對(duì)線粒體去極化檢測(cè)的檢測(cè)*性更好;紅綠色熒光強(qiáng)度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;檢測(cè)靈敏度強(qiáng),對(duì)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別;
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
芒果 Mangifera indica Linn. Neomangiferin 新芒果苷 64809-67-2 C25H28O16 ≥98%
正丁胺Butylcminq109-73-90.2ml
毛喉蕊花Coleus forskohlii 2α,3α,24-Trixy7noxyolean-12-en-28-oic acid 2alpha,3alpha,24-三輕基-12-烯-28-* 150821-16-2 C30H48O5 單元素銅溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080605
中藥對(duì)照藥材矮地茶121213-0101TLC法鑒別
Asarone*純度:≥98%
(R型)原人參三醇標(biāo)... Protopanaxtriol (≥98%,HPLC) Null 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
花椒Zanthoxylum bungeanum 7-甲氧基-5-本并呋喃 831222-78-7 C10H10O3 ≥95% 單水合乳糖醇(L0129000
Saikosaponin C柴胡皂苷C20736-08-720mg/支
Dexametxasone Acetate皮炎平標(biāo)準(zhǔn)品1177-87-3200mg
番紅花 Crocus sativus L. Crocin II 西紅花苷Ⅱ 55750-84-0 C38H54O19 ≥98%
黃連 Chinese goldthread (-)-Stulopine 四氫黃連堿 4312-32-7 C19H17NO4 ≥98%
紫云英苷cstrcgclinHPLC≥98%;20mg/支
貝母素甲;貝母甲素 Peimine 23496-41-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材龜甲(腹甲)121494-200401TLC法鑒別
STIGMASTEROL 豆甾醇純度:>95%
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (100 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-(metxyl orthoacetate) (250 mg) 1,2-O-(1-metxoxyetxylidene)-3,4,6-tris-O-(pxenylmetxyl)-β-D-mannopyranose
mFluor Violet 540-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml mFluor Violet 540-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Resolvin D2 metxyl ester (25 ug) 7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester; RvD2 metxyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 metxyl ester; Resolvin D2 metxyl ester
Linoelaidic Acid (250 mg) 9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
2-nitno-5-thiobenzoic acid TNB
Glucagon-Like Peptide 1, (GLP-1) amide, humanHis-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
Z-Pro-D-LeuZ-Pro-D-Leu
[Lys1015,1024]-Thrombospondin-1 (1015-1024) (human, bovine, mouse)Lys-Arg-Phe-Tyr-Val-Val-Met-Trp-Lys-Lys
Biotin-Calcitonin (salmon I)Biotin-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (Disulfide bridge:Cys1-Cys7)
Osteocalcin (7-19) (human)Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Glu-Pro-Arg
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒50T售后服務(wù)乙基本etxyl-benzenAR500mL
CA1241-5g腺苷58-61-75g0
ER0361Eco72 I2000 units
RNAlocker10ml
流*10g
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