產(chǎn)品名稱：正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞與壞死細(xì)胞檢測試劑盒售后服務(wù)
儲存條件：-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡介：
正常細(xì)胞/凋亡細(xì)胞/壞死細(xì)胞檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測細(xì)胞的狀態(tài)。染色液A可以透過正常細(xì)胞膜，而細(xì)胞凋亡后，細(xì)胞膜對染色液A的通透性增加，染色液B不能透過細(xì)胞膜，對正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞不能染色，而對壞死細(xì)胞可以染色。用兩種染色液對細(xì)胞進行雙染后，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡即可對細(xì)胞狀態(tài)進行檢測。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點圖上，這三群細(xì)胞表現(xiàn)分別為：正常細(xì)胞為低藍色/低紅色（A+/B+），凋亡細(xì)胞為高藍色/低紅色（A++/B+），壞死細(xì)胞為低藍色/高紅色（A+/B++）。
正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞與壞死細(xì)胞檢測試劑盒售后服務(wù)使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。

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Calponin鈣調(diào)節(jié)蛋白 濃縮液 0.1ml 進口分裝
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Caspase3 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Caspase8 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Caspase9 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD3 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD4 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD5 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD10 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD19(frozen) 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD20 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD22 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD25 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD29 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD30 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD31 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD34 1:200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD41 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD43 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45/T200/LCA 1:200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45RA 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45RO 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD68 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD79 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD81 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD95(冰凍) 濃縮液 0.1ml 進口分裝