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預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中的污染

時間:2018-4-13閱讀:80
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細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、*支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和菜氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(某些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、被污染細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材的污染、制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染,等等。
細(xì)胞分裂是指細(xì)胞分裂為兩個相同副本的過程。普通人的一生中要經(jīng)歷無數(shù)次的這一過程。為了生成兩個*相同的副本,細(xì)胞必須地分離它們的染色體,這一事件依賴于稱之為動粒(kinetochore)的專門結(jié)構(gòu)將染色體雙向附著到紡錘體微管上。在細(xì)胞分裂的早期階段,動粒結(jié)合紡錘體微管會發(fā)生許多的錯誤。正常的細(xì)胞能夠有效地糾正這些錯誤,確保染色體正確分離。而癌細(xì)胞通常不會糾正這些錯誤,使得子細(xì)胞染色體數(shù)目異常,從而幫助這些癌細(xì)胞抵抗*。
達特茅斯Geisel學(xué)院生物化學(xué)教授Compton也發(fā)表了一些言論,他認(rèn)為這一過程就像在約會,染色體在測試微管的兼容性,尋找正確的匹配,確保正確附著并且沒有錯誤。過去認(rèn)為這一過程中,就像傳統(tǒng)的約會一樣染色體和微管逐個配對以尋找正確的附著。結(jié)果表明這一系統(tǒng)更像是閃電約會。*有的染色體都必須在很短的時間內(nèi)嘗試與微管建立大量的。然后它們同時全部做出后的選擇。這一比喻形象說明了這過程,讓我們能更生動的想象,一一的呈現(xiàn)在腦海里。
由于體外細(xì)胞培養(yǎng)自身沒有抵抗污染的能力,而且培養(yǎng)基中的抗生素(antibiotic)抗污染能力有限,因而培養(yǎng)細(xì)胞一旦發(fā)生污染多數(shù)將無法挽回。支原體污染后,因為它們不會使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞*共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細(xì)胞手到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長等。
對照品    琥乙*    200mg    對照品
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對照品    *雜質(zhì)A    100mg    對照品
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對照品    舒巴坦    200mg    對照品
對照品    *    200mg    對照品
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細(xì)胞培養(yǎng)

 

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